<NBS5932> Methyl Coelenterazine 甲基腔腸素
貨號：NBS5932-50ug；
NBS5932-1mg
品牌：NoninBio
Methyl Coelenterazine 甲基腔腸素
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 | 價格 |
NBS5932-50ug | Methyl Coelenterazine 甲基腔腸素 | 50ug | 1316 |
NBS5932-1mg | Methyl Coelenterazine 甲基腔腸素 | 1mg | 5766 |
【溫馨提示】：見我司提供的活體成像底物-腔腸素及衍生物產品專題。
產品簡介：
腔腸素（Coelenterazine）是在水生生物中發現的一種發光基團（luminophore），是許多熒光素酶的作用底物，包括海腎熒光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜錨定熒光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和藪枝蟲熒光素酶（Obelia luciferase），和發光蛋白包括水母發光蛋白（Aequorin）的構成之一。其作用原理是以腔腸素為底物的熒光素酶，在含分子氧的條件下，氧化腔腸素產生高能量的中間產物，在此過程發射藍色光，光波長在450~480nm。而甲蟲（或螢火蟲）熒光素/熒光素酶（FLuc）系統不同，其在含分子氧的條件下，還需要ATP和Mg2+的存在才能同時發光，光波長在550-570nm。正由于生物發光信號和底物的差異，RLuc常常與FLuc聯合用于多重轉錄報告基因研究，或用作Fluc系統內螢火蟲熒光素酶轉染的內參。
腔腸素應用甚是廣泛，包括：1）活細胞或組織的鈣離子檢測；2）細胞或組織的超氧化物和過氧亞硝基陰離子（活性氧，ROS）化學發光檢測；3）基因報告基因檢測；4）動物活體檢測；5）ELISA和生物發光共振能量轉移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）藥物高通量篩選（HTS）。
天然腔腸素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在最豐富的一種腔腸素，也是目前應用最普遍的一種標準底物。不僅是脫輔基水母發光蛋白（APO）的底物，也是海腎熒光素酶（Rluc）和分泌型膜錨定熒光素酶（Gluc）等熒光素酶的作用底物。前者用于檢測鈣離子濃度，后者用作熒光素酶的報告基因檢測系統。還可用于生物共振能量轉移BRET，細胞或組織內的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子水平（ROS）的化學發光檢測等。
甲基腔腸素（Methyl Coelenterazine）據報道是一種優秀的抗氧化劑，抵抗活性氧物質（ROS）比如單態氧和超氧化物陰離子對細胞造成的損傷。此天然腔腸素衍生物具細胞膜滲透性、無毒、且與ROS高度反應。由于氧化應激是凋亡調節劑，因此甲基腔腸素是凋亡研究的另一種重要工具。
產品特性：
1）化學名：
3,7-dihydro-2-methyl-6-(p-hydroxyphenyl)-8 benzylimidazolo[1,2-a]pyrazin-3-one
2） 同義名：CLZm; Coelenterazine, 2-methyl 腔腸素，2-甲基；2-methyl Coelenterazine 2-甲基腔腸素；
3）分子式：C20H17N3O2
4）分子量：331.37 g/mol
5）純度：≥96%
6）外觀：黃色固體
7）溶解性：溶于甲醇或乙醇，不要溶于DMSO
8）化學結構圖：
保存條件:
-20℃干燥避光保存，且保存于惰性氣體內。至少一年有效。
附錄1 天然腔腸素及其衍生物的光譜特性：
產品名稱 | 產品編號 | Em (nm) | RLC[1] | Relative Intensity[2] | Half-rise time (ms) [3] |
466 | 1.00 | 1 | 6-30 | ||
466 | 0.75 | 16 | 6-30 | ||
400 | / | / | / | ||
405&465 | 0.5 | 4 | 0.15-0.3 | ||
472 | 0.80 | 20 | 6-30 | ||
442 | 0.63 | 28 | 2-5 | ||
445 | 0.65 | 500 | 2-5 | ||
468 | 0.25 | 0.15 | 6-30 | ||
[1] RLC = relative luminescence capacity: Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca2+relative to native aequorin = 1.0. [2] Ratio of the luminescence of aequorin reconstituted with coelenterazine analog relative to native aequorin at 100 nM Ca2+. [3] Half-Rise Time: The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50% of the maximum after addition of 1 mM Ca2+to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest. | |||||
附錄2天然腔腸素及其衍生物的應用差異：
產品編號 | 產品名稱 | 應用特征 |
應用非常廣泛的標準底物。腔腸素是天然水母發光蛋白復合物的發光基團，也是海腎熒光素酶（Rluc）的底物。底物的快速再生（fast regeneration）比較重要的實驗推薦使用天然腔腸素。 1）生物發光檢測鈣離子的靈敏度非常高，檢測范圍從0.1μM到＞100μM；2）使用腔腸素監測報告基因表達是其主要應用；3）其他應用包括生物共振能量轉移BRET，化學發光檢測細胞或組織內的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子水平（ROS）； | ||
1）腔腸素h形成的水母發光蛋白復合物比天然腔腸素復合物的光強度高10倍以上；2）比天然腔腸素對鈣離子敏感度更高；3）也適用報告基因分析。 | ||
也稱為DeepBlue C，是一種腔腸素衍生物，用作海腎熒光素酶Rluc的底物，發射峰約400nm。含GFP受體的BRET研究是Rluc的首選底物，因其對GFP受體的發射波干擾非常小。不可用作Gluc底物。 | ||
體外水母發光蛋白再生中腔腸素e的速度最高，具有雙發射峰，分別為405nm和465nm，使其能在pCa 5-7范圍內通過雙發射峰熒光強度比率的方式測定Ca2+濃度，提高檢測準確度。但由于滲透性差，不適合胞內應用。在溶液中穩定性差。 | ||
腔腸素f形成的水母發光蛋白復合物的光強度是天然腔腸素復合物的20倍，最大發射波長約長8nm。具有最好的細胞滲透性。當需要具極高鈣離子Ca2+靈敏度的水母發光蛋白復合物，建議用腔腸素f。 | ||
Coelenterazine cp產生水母發光蛋白復合物的光強度是天然腔腸素復合物的15倍，且具有更快的Ca2+反應性。 | ||
其生物發光強度最高（腔腸素hcp形成水母發光蛋白復合物的熒光強度比天然腔腸素復合物高190倍），對Ca2+反應速度快。 | ||
腔腸素fcp形成的水母發光蛋白復合物的光強度是天然腔腸素復合物的135倍。 | ||
所有的腔腸素衍生物中熒光強度最弱，對Ca2+反應時間明顯慢于天然腔腸素。一種非常有用的低靈敏腔腸素。 | ||
體外腔腸素i水母發光蛋白復合物的熒光強度僅為天然腔腸素復合物的3%，在所有腔腸素衍生物種對鈣離子的反應時間最慢。 | ||
體外腔腸素ip水母發光蛋白復合物的熒光強度幾乎比天然腔腸素復合物高50倍，但對鈣離子的反應時間比天然腔腸素慢。 | ||
非常優越的抗氧化劑，靶向細胞內來源于單態氧和超氧化物陰離子產生的活性氧物質（ROS）。 |
注意事項：
1. 腔腸素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物最好以完全凍干粉的狀態保存在惰性氣體內，密封后置于-20℃或-70℃長期避光保存。管內即使有微量空氣，也會隨著時間慢慢氧化腔腸素使其活性喪失，這樣不同實驗之間的定量結果可能很不可信。
2. 腔腸素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物不建議以儲存液的形式保存，最好于實驗前配制新鮮的溶液。不建議將配好的腔腸素溶液儲存在-20℃或-70℃，因其具有一個高能量的二氧雜環丁酮環形結構，即使在低溫條件下都會自發降解。
3. 商業化腔腸素的種類繁多，有天然腔腸素，以及各種腔腸素衍生物（比如，腔腸素h，腔腸素400a，腔腸素e，腔腸素f，腔腸素hcp）。它們對鈣離子的親和力，光譜特性，以及應用傾向上會有差異，詳見附錄1—天然腔腸素及其衍生物的光譜特性，附錄2—天然腔腸素及其衍生物的應用差異選擇適當的產品。
4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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