Methyl Coelenterazine 甲基腔腸素
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 | 價(jià)格 |
NBS5932-50ug | Methyl Coelenterazine 甲基腔腸素 | 50ug | 1316 |
NBS5932-1mg | Methyl Coelenterazine 甲基腔腸素 | 1mg | 5766 |
【溫馨提示】:見我司提供的活體成像底物-腔腸素及衍生物產(chǎn)品專題。
產(chǎn)品簡介:
腔腸素(Coelenterazine)是在水生生物中發(fā)現(xiàn)的一種發(fā)光基團(tuán)(luminophore),是許多熒光素酶的作用底物,包括海腎熒光素酶(Renilla reniformis luciferase, Rluc),分泌型膜錨定熒光素酶(Gaussia luciferase, Gluc)和藪枝蟲熒光素酶(Obelia luciferase),和發(fā)光蛋白包括水母發(fā)光蛋白(Aequorin)的構(gòu)成之一。其作用原理是以腔腸素為底物的熒光素酶,在含分子氧的條件下,氧化腔腸素產(chǎn)生高能量的中間產(chǎn)物,在此過程發(fā)射藍(lán)色光,光波長在450~480nm。而甲蟲(或螢火蟲)熒光素/熒光素酶(FLuc)系統(tǒng)不同,其在含分子氧的條件下,還需要ATP和Mg2+的存在才能同時(shí)發(fā)光,光波長在550-570nm。正由于生物發(fā)光信號和底物的差異,RLuc常常與FLuc聯(lián)合用于多重轉(zhuǎn)錄報(bào)告基因研究,或用作Fluc系統(tǒng)內(nèi)螢火蟲熒光素酶轉(zhuǎn)染的內(nèi)參。
腔腸素應(yīng)用甚是廣泛,包括:1)活細(xì)胞或組織的鈣離子檢測;2)細(xì)胞或組織的超氧化物和過氧亞硝基陰離子(活性氧,ROS)化學(xué)發(fā)光檢測;3)基因報(bào)告基因檢測;4)動物活體檢測;5)ELISA和生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)用于蛋白相互作用研究;6)藥物高通量篩選(HTS)。
天然腔腸素(Coelenterazine Native,CTZ-Native)是自然界中存在最豐富的一種腔腸素,也是目前應(yīng)用最普遍的一種標(biāo)準(zhǔn)底物。不僅是脫輔基水母發(fā)光蛋白(APO)的底物,也是海腎熒光素酶(Rluc)和分泌型膜錨定熒光素酶(Gluc)等熒光素酶的作用底物。前者用于檢測鈣離子濃度,后者用作熒光素酶的報(bào)告基因檢測系統(tǒng)。還可用于生物共振能量轉(zhuǎn)移BRET,細(xì)胞或組織內(nèi)的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子水平(ROS)的化學(xué)發(fā)光檢測等。
甲基腔腸素(Methyl Coelenterazine)據(jù)報(bào)道是一種優(yōu)秀的抗氧化劑,抵抗活性氧物質(zhì)(ROS)比如單態(tài)氧和超氧化物陰離子對細(xì)胞造成的損傷。此天然腔腸素衍生物具細(xì)胞膜滲透性、無毒、且與ROS高度反應(yīng)。由于氧化應(yīng)激是凋亡調(diào)節(jié)劑,因此甲基腔腸素是凋亡研究的另一種重要工具。
產(chǎn)品特性:
1)化學(xué)名:
3,7-dihydro-2-methyl-6-(p-hydroxyphenyl)-8 benzylimidazolo[1,2-a]pyrazin-3-one
2) 同義名:CLZm; Coelenterazine, 2-methyl 腔腸素,2-甲基;2-methyl Coelenterazine 2-甲基腔腸素;
3)分子式:C20H17N3O2
4)分子量:331.37 g/mol
5)純度:≥96%
6)外觀:黃色固體
7)溶解性:溶于甲醇或乙醇,不要溶于DMSO
8)化學(xué)結(jié)構(gòu)圖:
保存條件:
-20℃干燥避光保存,且保存于惰性氣體內(nèi)。至少一年有效。
附錄1 天然腔腸素及其衍生物的光譜特性:
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | Em (nm) | RLC[1] | Relative Intensity[2] | Half-rise time (ms) [3] |
466 | 1.00 | 1 | 6-30 | ||
466 | 0.75 | 16 | 6-30 | ||
400 | / | / | / | ||
405&465 | 0.5 | 4 | 0.15-0.3 | ||
472 | 0.80 | 20 | 6-30 | ||
442 | 0.63 | 28 | 2-5 | ||
445 | 0.65 | 500 | 2-5 | ||
468 | 0.25 | 0.15 | 6-30 | ||
[1] RLC = relative luminescence capacity: Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca2+relative to native aequorin = 1.0. [2] Ratio of the luminescence of aequorin reconstituted with coelenterazine analog relative to native aequorin at 100 nM Ca2+. [3] Half-Rise Time: The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50% of the maximum after addition of 1 mM Ca2+to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest. |
附錄2天然腔腸素及其衍生物的應(yīng)用差異:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 應(yīng)用特征 |
應(yīng)用非常廣泛的標(biāo)準(zhǔn)底物。腔腸素是天然水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的發(fā)光基團(tuán),也是海腎熒光素酶(Rluc)的底物。底物的快速再生(fast regeneration)比較重要的實(shí)驗(yàn)推薦使用天然腔腸素。 1)生物發(fā)光檢測鈣離子的靈敏度非常高,檢測范圍從0.1μM到>100μM;2)使用腔腸素監(jiān)測報(bào)告基因表達(dá)是其主要應(yīng)用;3)其他應(yīng)用包括生物共振能量轉(zhuǎn)移BRET,化學(xué)發(fā)光檢測細(xì)胞或組織內(nèi)的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子水平(ROS); | ||
1)腔腸素h形成的水母發(fā)光蛋白復(fù)合物比天然腔腸素復(fù)合物的光強(qiáng)度高10倍以上;2)比天然腔腸素對鈣離子敏感度更高;3)也適用報(bào)告基因分析。 | ||
也稱為DeepBlue C,是一種腔腸素衍生物,用作海腎熒光素酶Rluc的底物,發(fā)射峰約400nm。含GFP受體的BRET研究是Rluc的首選底物,因其對GFP受體的發(fā)射波干擾非常小。不可用作Gluc底物。 | ||
體外水母發(fā)光蛋白再生中腔腸素e的速度最高,具有雙發(fā)射峰,分別為405nm和465nm,使其能在pCa 5-7范圍內(nèi)通過雙發(fā)射峰熒光強(qiáng)度比率的方式測定Ca2+濃度,提高檢測準(zhǔn)確度。但由于滲透性差,不適合胞內(nèi)應(yīng)用。在溶液中穩(wěn)定性差。 | ||
腔腸素f形成的水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的光強(qiáng)度是天然腔腸素復(fù)合物的20倍,最大發(fā)射波長約長8nm。具有最好的細(xì)胞滲透性。當(dāng)需要具極高鈣離子Ca2+靈敏度的水母發(fā)光蛋白復(fù)合物,建議用腔腸素f。 | ||
Coelenterazine cp產(chǎn)生水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的光強(qiáng)度是天然腔腸素復(fù)合物的15倍,且具有更快的Ca2+反應(yīng)性。 | ||
其生物發(fā)光強(qiáng)度最高(腔腸素hcp形成水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的熒光強(qiáng)度比天然腔腸素復(fù)合物高190倍),對Ca2+反應(yīng)速度快。 | ||
腔腸素fcp形成的水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的光強(qiáng)度是天然腔腸素復(fù)合物的135倍。 | ||
所有的腔腸素衍生物中熒光強(qiáng)度最弱,對Ca2+反應(yīng)時(shí)間明顯慢于天然腔腸素。一種非常有用的低靈敏腔腸素。 | ||
體外腔腸素i水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的熒光強(qiáng)度僅為天然腔腸素復(fù)合物的3%,在所有腔腸素衍生物種對鈣離子的反應(yīng)時(shí)間最慢。 | ||
體外腔腸素ip水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的熒光強(qiáng)度幾乎比天然腔腸素復(fù)合物高50倍,但對鈣離子的反應(yīng)時(shí)間比天然腔腸素慢。 | ||
非常優(yōu)越的抗氧化劑,靶向細(xì)胞內(nèi)來源于單態(tài)氧和超氧化物陰離子產(chǎn)生的活性氧物質(zhì)(ROS)。 |
注意事項(xiàng):
1. 腔腸素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物最好以完全凍干粉的狀態(tài)保存在惰性氣體內(nèi),密封后置于-20℃或-70℃長期避光保存。管內(nèi)即使有微量空氣,也會隨著時(shí)間慢慢氧化腔腸素使其活性喪失,這樣不同實(shí)驗(yàn)之間的定量結(jié)果可能很不可信。
2. 腔腸素(Coelenterazine, CTZ)及衍生物不建議以儲存液的形式保存,最好于實(shí)驗(yàn)前配制新鮮的溶液。不建議將配好的腔腸素溶液儲存在-20℃或-70℃,因其具有一個(gè)高能量的二氧雜環(huán)丁酮環(huán)形結(jié)構(gòu),即使在低溫條件下都會自發(fā)降解。
3. 商業(yè)化腔腸素的種類繁多,有天然腔腸素,以及各種腔腸素衍生物(比如,腔腸素h,腔腸素400a,腔腸素e,腔腸素f,腔腸素hcp)。它們對鈣離子的親和力,光譜特性,以及應(yīng)用傾向上會有差異,詳見附錄1—天然腔腸素及其衍生物的光譜特性,附錄2—天然腔腸素及其衍生物的應(yīng)用差異選擇適當(dāng)?shù)漠a(chǎn)品。
4. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。