Coelenterazine f 腔腸素f

【溫馨提示】：見(jiàn)我司提供的活體成像底物-腔腸素及衍生物產(chǎn)品專題。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

腔腸素（Coelenterazine）是在水生生物中發(fā)現(xiàn)的一種發(fā)光基團(tuán)（luminophore），是許多熒光素酶的作用底物，包括海腎熒光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜錨定熒光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和藪枝蟲熒光素酶（Obelia luciferase），和發(fā)光蛋白包括水母發(fā)光蛋白（Aequorin）的構(gòu)成之一。其作用原理是以腔腸素為底物的熒光素酶，在含分子氧的條件下，氧化腔腸素產(chǎn)生高能量的中間產(chǎn)物，在此過(guò)程發(fā)射藍(lán)色光，光波長(zhǎng)在450~480nm。而甲蟲（或螢火蟲）熒光素/熒光素酶（FLuc）系統(tǒng)不同，其在含分子氧的條件下，還需要ATP和Mg²⁺的存在才能同時(shí)發(fā)光，光波長(zhǎng)在550-570nm。正由于生物發(fā)光信號(hào)和底物的差異，RLuc常常與FLuc聯(lián)合用于多重轉(zhuǎn)錄報(bào)告基因研究，或用作Fluc系統(tǒng)內(nèi)螢火蟲熒光素酶轉(zhuǎn)染的內(nèi)參。

腔腸素應(yīng)用甚是廣泛，包括：1）活細(xì)胞或組織的鈣離子檢測(cè)；2）細(xì)胞或組織的超氧化物和過(guò)氧亞硝基陰離子（活性氧，ROS）化學(xué)發(fā)光檢測(cè)；3）基因報(bào)告基因檢測(cè)；4）動(dòng)物活體檢測(cè)；5）ELISA和生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）藥物高通量篩選（HTS）。

天然腔腸素（Coelenterazine Native，CTZ-Native）是自然界中存在最豐富的一種腔腸素，也是目前應(yīng)用最普遍的一種標(biāo)準(zhǔn)底物。不僅是脫輔基水母發(fā)光蛋白（APO）的底物，也是海腎熒光素酶（Rluc）和分泌型膜錨定熒光素酶（Gluc）等熒光素酶的作用底物。前者用于檢測(cè)鈣離子濃度，后者用作熒光素酶的報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)。還可用于生物共振能量轉(zhuǎn)移BRET，細(xì)胞或組織內(nèi)的超氧陰離子和過(guò)氧化亞硝基陰離子水平（ROS）的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)等。

腔腸素f（Coelenterazine f，CTZ-f），是一種天然腔腸素（CTZ-Native）的合成衍生物，是水母發(fā)光蛋白的首選底物。CTZ-f的水母發(fā)光蛋白復(fù)合物比CTZ-Native形成的復(fù)合物熒光強(qiáng)度幾乎高20倍，最大發(fā)射波長(zhǎng)為473nm。

產(chǎn)品特性：

1）CAS NO：123437-16-1

2）化學(xué)名：8-benzyl-2-(4-fluorobenzyl)-6-(4-hydroxyphenyl)imidazo[1,2- a]pyrazin-3(7H)-one

3）同義名：Coelenterazine F; CTZ-F; CLZN-f; f-腔腸素；Coelenterazine-Fluoride;

4）分子式：C26H20FN3O2

5）分子量：425.5 g/mol

6）純度：>95%

7）外觀：橙色至棕色固體

8）溶解性：溶于甲醇或乙醇，不要溶于DMSO。

9）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖：

保存條件: 

-20℃干燥避光保存，且保存于惰性氣體內(nèi)。至少一年有效。

產(chǎn)品使用：

一、 腔腸素f的溶解事項(xiàng)

1）腔腸素f不溶于水，接觸到空氣，水分或任何氧化劑都不穩(wěn)定。千萬(wàn)不要溶于DMSO，因會(huì)發(fā)生未知反應(yīng)引起腔腸素f的快速降解并生成未知的代謝產(chǎn)物。

2） 腔腸素f溶于甲醇或乙醇，毒性最小的溶劑是無(wú)水乙醇，可溶解粉末配制成0.1-1mg/ml溶液，之后加入需要的緩沖液，盡量保持緩沖液pH小于7.0，因大多數(shù)腔腸素衍生物在堿性條件會(huì)快速降解，有時(shí)會(huì)立即產(chǎn)生沉淀。

二、 腔腸素f的保存事項(xiàng)

最好在使用前，才用無(wú)水乙醇溶解腔腸素f粉末，然后用所選的緩沖液稀釋并混勻。此時(shí)配好的工作緩沖液需靜置20-30min使其穩(wěn)定（因部分底物會(huì)發(fā)生自氧化）后才進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)。該工作液能穩(wěn)定保存幾個(gè)小時(shí)（室溫3-4h），僅微弱的信號(hào)衰減可能發(fā)生。

不建議將腔腸素f的乙醇溶液置于-20℃或-70℃保存，因天然腔腸素及任何衍生物含有一個(gè)高能量的二氧雜環(huán)丁酮環(huán)形結(jié)構(gòu)，即使在低溫條件下都會(huì)自發(fā)降解。

附錄1 天然腔腸素及其衍生物的光譜特性：

附錄2天然腔腸素及其衍生物的應(yīng)用差異：

注意事項(xiàng)：

1.      腔腸素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物最好以完全凍干粉的狀態(tài)保存在惰性氣體內(nèi)，密封后置于-20℃或-70℃長(zhǎng)期避光保存。管內(nèi)即使有微量空氣，也會(huì)隨著時(shí)間慢慢氧化腔腸素使其活性喪失，這樣不同實(shí)驗(yàn)之間的定量結(jié)果可能很不可信。

2.      腔腸素（Coelenterazine， CTZ）及衍生物不建議以儲(chǔ)存液的形式保存，最好于實(shí)驗(yàn)前配制新鮮的溶液。不建議將配好的腔腸素溶液儲(chǔ)存在-20℃或-70℃，因其具有一個(gè)高能量的二氧雜環(huán)丁酮環(huán)形結(jié)構(gòu)，即使在低溫條件下都會(huì)自發(fā)降解。

3.      商業(yè)化腔腸素的種類繁多，有天然腔腸素，以及各種腔腸素衍生物（比如，腔腸素h，腔腸素400a，腔腸素e，腔腸素f，腔腸素hcp）。它們對(duì)鈣離子的親和力，光譜特性，以及應(yīng)用傾向上會(huì)有差異，詳見(jiàn)附錄1—天然腔腸素及其衍生物的光譜特性，附錄2—天然腔腸素及其衍生物的應(yīng)用差異選擇適當(dāng)?shù)漠a(chǎn)品。

4.      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。