Injectable h-Coelenterazine 注射用腔腸素h

【溫馨提示】：見我司提供的活體成像底物-腔腸素及衍生物產品專題。

產品簡介：

腔腸素（Coelenterazine）是在水生生物中發現的一種發光基團（luminophore），是許多熒光素酶的作用底物，包括海腎熒光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜錨定熒光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和藪枝蟲熒光素酶（Obelia luciferase），和發光蛋白包括水母發光蛋白（Aequorin）的構成之一。其作用原理是以腔腸素為底物的熒光素酶，在含分子氧的條件下，氧化腔腸素產生高能量的中間產物，在此過程中發射藍色光，光波長在450~480nm。而甲蟲（或螢火蟲）熒光素/熒光素酶（FLuc）系統不同，其在含分子氧的條件下，還需要ATP和Mg²⁺的存在才能同時發光，光波長在550-570nm。正由于生物發光信號和底物的差異，RLuc常常與FLuc聯合用于多重轉錄報告基因研究，或用作Fluc系統內螢火蟲熒光素酶轉染的內參。

腔腸素應用甚是廣泛，包括：1）活細胞或組織的鈣離子檢測；2）細胞或組織的超氧化物和過氧亞硝基陰離子（活性氧，ROS）化學發光檢測；3）基因報告基因檢測；4）動物活體檢測；5）ELISA和生物發光共振能量轉移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）藥物高通量篩選（HTS）。

腔腸素h（Coelenterazine h，CTZ-h）是天然腔腸素（Coelenterazine native，CTZ-native）的脫羥基衍生物。CTZ-h形成的水母發光蛋白復合物比CTZ-native形成的水母發光蛋白復合物的熒光強度高10倍以上（最大發射波長~466nm，半衰期為0.6-1.2sec）。CTZ-h形成的水母發光蛋白復合物比天然發光復合物對鈣離子靈敏度更高，是一種檢測鈣離子濃度微小變化的實用探針。另外，CTZ-h是海腎熒光素酶（Renilla luciferase，Rluc）的底物，適用于體內外報告基因分析。

本品為專供體內成像研究的注射用腔腸素h（Injectable h-Coelenterazine），不僅含有超純的腔腸素h（＞99%），還提供特別設計的Inject-Diluent溶劑，能夠最大程度的溶解腔腸素h，從而最小化體內注射體積。另外，與傳統乙醇溶解的腔腸素h相比，用Inject-Diluent溶解的腔腸素h能得到更好的熒光信號。

保存條件: 

-20℃干燥避光保存，且保存于惰性氣體內。至少一年有效。

產品組成：

產品使用：

1．使用裝有23 gauge或更小針頭的0.5-1.0ml注射器，吸取150μl 溫熱（35-50℃）的Inject-Diluent。

2．將150μl Inject-Diluent打入Native Coelenterazine瓶內，使用針頭和注射器上下吸打或低速渦旋，直至看到完全透明溶液，此時得到腔腸素溶液濃度為3.33mg/ml。如果溶液沒有完全透明，用水浴鍋或加熱板在60-80℃加熱幾分鐘，檢查完全透明。

3．按下表1，用胰島素注射器吸取15-75μl充分溶解的腔腸素h溶液（3.33mg/ml），通過尾靜脈注射到動物體內。檢查，排氣，沖洗針頭。使用胰島素注射器的優勢在于很低的液體滯留體積（＜2μl）。緩慢注射。

建議按照表1單只小鼠（25g體重）的腔腸素h溶液（3.33mg/ml）注射劑量表

附錄1 天然腔腸素及其衍生物的光譜特性：

附錄2天然腔腸素及其衍生物的應用差異：

注意事項：

1.      本品特別開發適用于體內實驗。若僅做體外實驗，可使用我司提供的天然腔腸素（Coelenterazine Native）（貨號：NBS5918）或腔腸素h（Coelenterazine h）（貨號：NBS5920）。

2.      發光蛋白與熒光素酶是完全不同的，比如腔腸素h（CTZ-h）適合用作海腎熒光素酶（Rluc）的底物，但不適合用作分泌型膜錨定熒光素酶（Gluc）的底物。天然腔腸素（CTZ-native）是唯一適合分泌型膜錨定熒光素酶的一種報告基因底物。

3.      商業化腔腸素的種類繁多，有天然腔腸素，以及各種腔腸素衍生物（比如，腔腸素h，腔腸素400a，腔腸素e，腔腸素f，腔腸素hcp）。它們對鈣離子的親和力，光譜特性，以及應用傾向上會有差異，詳見附錄1—天然腔腸素及其衍生物的光譜特性，附錄2—天然腔腸素及其衍生物的應用差異選擇適當的產品。

4.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。