NBS5919 Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔腸素

欄目：NoninBio

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Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔腸素
貨號：NBS5919-1mg；
NBS5919-10mg
品牌：NoninBio

Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔腸素

產品編號	產品名稱	包裝規格	價格
NBS5919-1mg	Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔腸素	2x500ug	2248
NBS5919-10mg	Injectable native Coelenterazine 注射用天然腔腸素	20x500ug	18623

【溫馨提示】：見我司提供的活體成像底物-腔腸素及衍生物產品專題。

產品簡介：

腔腸素（Coelenterazine）是在水生生物中發現的一種發光基團（luminophore），是許多熒光素酶的作用底物，包括海腎熒光素酶（Renilla reniformis luciferase, Rluc），分泌型膜錨定熒光素酶（Gaussia luciferase, Gluc）和藪枝蟲熒光素酶（Obelia luciferase），和發光蛋白包括水母發光蛋白（Aequorin）的構成之一。其作用原理是以腔腸素為底物的熒光素酶，在含分子氧的條件下，氧化腔腸素產生高能量的中間產物，在此過程中發射藍色光，光波長在450~480nm。而甲蟲（或螢火蟲）熒光素/熒光素酶（FLuc）系統不同，其在含分子氧的條件下，還需要ATP和Mg²⁺的存在才能同時發光，光波長在550-570nm。正由于生物發光信號和底物的差異，RLuc常常與FLuc聯合用于多重轉錄報告基因研究，或用作Fluc系統內螢火蟲熒光素酶轉染的內參。

腔腸素應用甚是廣泛，包括：1）活細胞或組織的鈣離子檢測；2）細胞或組織的超氧化物和過氧亞硝基陰離子（活性氧，ROS）化學發光檢測；3）基因報告基因檢測；4）動物活體檢測；5）ELISA和生物發光共振能量轉移（BRET）用于蛋白相互作用研究；6）藥物高通量篩選（HTS）。

天然腔腸素（Coelenterazine Native）是自然界中存在最豐富的一種腔腸素，也是目前應用最普遍的一種標準底物。不僅是天然水母發光蛋白復合物的發光基團，也是海腎熒光素酶（Rluc）和分泌型膜錨定熒光素酶（Gluc）等的作用底物。還可用于生物共振能量轉移BRET，細胞或組織內的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子水平（ROS）的化學發光檢測。

本品為專供體內成像研究的注射用天然腔腸素（Injectable native Coelenterazine），不僅含有超純的天然腔腸素（＞99%），還提供特別設計的Inject-Diluent溶劑，能夠最大程度的溶解腔腸素，從而最小化體內注射體積。另外，與傳統乙醇溶解的腔腸素相比，用Inject-Diluent溶解的腔腸素能得到更好的熒光信號。

保存條件:

-20℃干燥避光保存，且保存于惰性氣體內。至少一年有效。

產品組成：

組分	名稱	規格
組分	名稱	NBS5919-1mg	NBS5919-10mg
NBS5919-A	Native Coelenterazine	2×500μg	20×500μg
NBS5919-B	Inject-Diluent	1×500μl	10×500μl

產品使用：

1．使用裝有23 gauge或更小針頭的0.5-1.0ml注射器，吸取150μl 溫熱（35-50℃）的Inject-Diluent。

2．將150μl Inject-Diluent打入Native Coelenterazine瓶內，使用針頭和注射器上下吸打或低速渦旋，直至看到完全透明溶液，此時得到腔腸素溶液濃度為3.33mg/ml。如果溶液沒有完全透明，用水浴鍋或加熱板在60-80℃加熱幾分鐘，檢查完全透明。

3．按下表1，用胰島素注射器吸取15-75μl充分溶解的腔腸素溶液（3.33mg/ml），通過尾靜脈注射到動物體內。檢查，排氣，沖洗針頭。使用胰島素注射器的優勢在于很低的液體滯留體積（＜2μl）。緩慢注射。

建議按照表1單只小鼠（25g體重）的腔腸素溶液（3.33mg/ml）注射劑量表

需要的底物質量	腔腸素溶液注射體積
50μg	15μl
100μg	30μl
200μg	60μl
250μg	75μl

【注意：分泌型膜錨定熒光素酶（Gluc）比其他熒光素酶強許多倍，具有更高的Km值，因此需要更多的腔腸素底物來達到理想的信號值。天然腔腸素是唯一的底物能用于分泌型膜錨定熒光素酶。建議每只25g體重的小鼠，使用100-200μg腔腸素。往每只25g小鼠內注射的液體量不要超過70-80μl。若需要更高底物，可提高腔腸素溶液的濃度。】

附錄1 天然腔腸素及其衍生物的光譜特性：

產品名稱	產品編號	Em (nm)	RLC[1]	Relative Intensity[2]	Half-rise time (ms) [3]
Coelenterazine native	NBS5918	466	1.00	1	6-30
Coelenterazine h	NBS5920	466	0.75	16	6-30
Coelenterazine 400 a	NBS5922	400	/	/	/
Coelenterazine e	NBS5923	405&465	0.5	4	0.15-0.3
Coelenterazine f	NBS5924	472	0.80	20	6-30
Coelenterazine cp	NBS5925	442	0.63	28	2-5
Coelenterazine hcp	NBS5926	445	0.65	500	2-5
Coelenterazine n	NBS5928	468	0.25	0.15	6-30
[1] RLC = relative luminescence capacity: Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca²⁺relative to native aequorin = 1.0. [2] Ratio of the luminescence of aequorin reconstituted with coelenterazine analog relative to native aequorin at 100 nM Ca²⁺. [3] Half-Rise Time: The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50% of the maximum after addition of 1 mM Ca²⁺to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest.

附錄2天然腔腸素及其衍生物的應用差異：

產品編號	產品名稱	應用特征
NBS5918	Coelenterazine native	應用非常廣泛的標準底物。腔腸素是天然水母發光蛋白復合物的發光基團，也是海腎熒光素酶（Rluc）的底物。底物的快速再生（fast regeneration）比較重要的實驗推薦使用天然腔腸素。 1）生物發光檢測鈣離子的靈敏度非常高，檢測范圍從0.1μM到＞100μM；2）使用腔腸素監測報告基因表達是其主要應用；3）其他應用包括生物共振能量轉移BRET，化學發光檢測細胞或組織內的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子水平（ROS）；
NBS5920	Coelenterazine h	1）腔腸素h形成的水母發光蛋白復合物比天然腔腸素復合物的光強度高10倍以上；2）比天然腔腸素對鈣離子敏感度更高；3）也適用報告基因分析。
NBS5922	Coelenterazine 400 a	也稱為DeepBlue C，是一種腔腸素衍生物，用作海腎熒光素酶Rluc的底物，發射峰約400nm。含GFP受體的BRET研究是Rluc的首選底物，因其對GFP受體的發射波干擾非常小。不可用作Gluc底物。
NBS5923	Coelenterazine e	體外水母發光蛋白再生中腔腸素e的速度最高，具有雙發射峰，分別為405nm和465nm，使其能在pCa 5-7范圍內通過雙發射峰熒光強度比率的方式測定Ca²⁺濃度，提高檢測準確度。但由于滲透性差，不適合胞內應用。在溶液中穩定性差。
NBS5924	Coelenterazine f	腔腸素f形成的水母發光蛋白復合物的光強度是天然腔腸素復合物的20倍，最大發射波長約長8nm。具有最好的細胞滲透性。當需要具極高鈣離子Ca²⁺靈敏度的水母發光蛋白復合物，建議用腔腸素f。
NBS5925	Coelenterazine cp	Coelenterazine cp產生水母發光蛋白復合物的光強度是天然腔腸素復合物的15倍，且具有更快的Ca²⁺反應性。
NBS5926	Coelenterazine hcp	其生物發光強度最高（腔腸素hcp形成水母發光蛋白復合物的熒光強度比天然腔腸素復合物高190倍），對Ca²⁺反應速度快。
NBS5927	Coelenterazine fcp	腔腸素fcp形成的水母發光蛋白復合物的光強度是天然腔腸素復合物的135倍。
NBS5928	Coelenterazine n	所有的腔腸素衍生物中熒光強度最弱，對Ca2+反應時間明顯慢于天然腔腸素。一種非常有用的低靈敏腔腸素。
NBS5929	Coelenterazine i	體外腔腸素i水母發光蛋白復合物的熒光強度僅為天然腔腸素復合物的3%，在所有腔腸素衍生物種對鈣離子的反應時間最慢。
NBS5930	Coelenterazine ip	體外腔腸素ip水母發光蛋白復合物的熒光強度幾乎比天然腔腸素復合物高50倍，但對鈣離子的反應時間比天然腔腸素慢。
NBS5932	Methyl Coelenterazine	非常優越的抗氧化劑，靶向細胞內來源于單態氧和超氧化物陰離子產生的活性氧物質（ROS）。

注意事項：

1. 本品特別開發適用于體內實驗。若僅做體外實驗，可使用我司提供的天然腔腸素（Coelenterazine Native）（貨號：NBS5918）或腔腸素h（Coelenterazine h）（貨號：NBS5920）。

2. 商業化腔腸素的種類繁多，有天然腔腸素，以及各種腔腸素衍生物（比如，腔腸素h，腔腸素400a，腔腸素e，腔腸素f，腔腸素hcp）。它們對鈣離子的親和力，光譜特性，以及應用傾向上會有差異，詳見附錄1—天然腔腸素及其衍生物的光譜特性，附錄2—天然腔腸素及其衍生物的應用差異選擇適當的產品。

3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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