pH熒光探針（紅600-乳膠微珠偶聯物）

產品簡介：

pH Red 600-乳膠微球偶聯物展現出顯著的pH依賴性熒光特性。與多數在堿性條件下熒光更強的傳統染料不同，該偶聯物在酸性環境中熒光信號會顯著增強。當pH從中性降至酸性范圍時，其熒光強度呈現急劇升高，這一特性使其成為研究吞噬作用及其受藥物/環境因素調控的可靠工具。

該偶聯物在細胞外僅呈現微弱熒光（無需洗滌步驟），但在吞噬體、溶酶體和內體等酸性區室中會發出明亮的紅色熒光。這種獨特的"酸性激活"特性使其能夠：精準示蹤吞噬過程；與GFP、Fluo-8、鈣黃綠素或FITC標記抗體等綠色熒光探針聯用，實現多功能細胞分析；該產品特別適用于免疫學研究、藥物開發，以及先天免疫功能、自噬或顆粒內吞等機制研究。

產品特性：

1)     分子量：N/A

2)     固體含量：1% in PBS

3)     每毫升微球數量：~4e+10

4)     溶解度：在水中溶解

5)     Ex(nm)：576

6)     Em(nm)：597

7)     平均直徑：0.72 μm

pH熒光探針（紅600）的pH依賴性發射光譜

保存條件: 

-20℃避光保存，2年有效。

產品使用：（僅供參考）

1.      將粒細胞重懸于含20 mM Hepes的Hanks緩沖液（HHBS）中，調整濃度至10? cells/mL，取100 μL細胞懸液加入聚丙烯離心管。

注：最佳細胞密度需根據細胞系特性單獨評估。

2.      向離心管中加入1-10 μL pH Red 600-乳膠微球偶聯物，37°C溫和振蕩孵育30分鐘

注：合適的孵育時間需根據細胞系特性優化。

3.      準備一個相同的樣品，在4°C下孵育作為對照。

4.      孵育30分鐘結束時，通過加入2mL冰冷的HHBS終止吞噬作用。混合，然后用冷HBSS洗滌細胞2次。

5.      將細胞重懸于500 μL冷HBSS中，將樣品保持在 4°C，并立即使用配備Texas Red濾光片組的熒光顯微鏡進行分析。

注意：若使用熒光酶標儀，檢測參數設為：激發/發射=570/600 nm（截止波長585 nm）

實驗結果：

圖：通過pH Red 600-乳膠微球偶聯物在RAW 264.7細胞中檢測吞噬作用。將細胞在生長培養基中與pH Red 600-乳膠微球孵育4小時。使用Cell-Tracker Green CMFDA（貨號NBS5138）追蹤活細胞。該圖像（20X）使用Keyence熒光顯微鏡拍攝。

注意事項：

1.      熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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