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<NA0531> Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)

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<NA0531> Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)
NA0531-1ML
NA0531-5ML
NA0531-10ML
品牌:NoninBio
促銷: 450.00~3600.00
價(jià)格: 565.00~4500.00
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 殺稻瘟菌素S(滅瘟素)(10mg/ml)

Blasticidin S (10mg/ml)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

殺稻瘟菌素SBlasticidin S)是一種分離自灰色鏈霉菌(Streptomyces griseochromogenes)的核苷肽類抗生素,通過(guò)特異性干擾核糖體肽鍵形成,強(qiáng)效抑制原核與真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成。本品主要用于篩選攜帶bsrBSD耐藥基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞,具有起效迅速、作用強(qiáng)勁的特點(diǎn),通常一周內(nèi)即可完成陽(yáng)性克隆篩選,且極低濃度即可快速殺滅敏感細(xì)胞。

本品為溶于HEPES緩沖液(pH7.5)的即用型無(wú)菌溶液,濃度10mg/ml。細(xì)菌篩選常用濃度為25100μg/ml,哺乳動(dòng)物細(xì)胞篩選常用濃度為150μg/ml。初次實(shí)驗(yàn)建議通過(guò)殺滅曲線確定最佳工作濃度,以實(shí)現(xiàn)篩選效率與成本的最優(yōu)化。

 

保存條件

-20℃保存(一年有效)

 

產(chǎn)品特性:

1)     同義名:Blasticidin S Hydrochloride; 滅瘟素S鹽酸鹽; 稻瘟散;

2)     CAS NO.3513-03-9

3)     分子式:C17H26N8O5·HCl

4)     分子量:458.9

5)     純度:>95%HPLC

6)     化學(xué)結(jié)構(gòu)式:

 

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產(chǎn)品使用:

1.     大腸桿菌(E. coli)篩選(推薦濃度:25100 μg/ml

大腸桿菌對(duì)Blasticidin S天然敏感性較低,但攜帶bsrBSD抗性基因的轉(zhuǎn)化子可在低鹽LB固體培養(yǎng)基(pH 8.0)中,采用100μg/ml Blasticidin S進(jìn)行高效篩選。注意:適當(dāng)提高pH值(至8.0)可顯著增強(qiáng)抗生素的篩選活性,提高陽(yáng)性克隆檢出率。

2.     哺乳動(dòng)物細(xì)胞篩選(常用濃度:150μg/ml

哺乳動(dòng)物細(xì)胞系Blasticidin S的推薦工作濃度范圍為150μg/ml。由于不同細(xì)胞系對(duì)抗生素敏感性差異較大,初次實(shí)驗(yàn)強(qiáng)烈建議通過(guò)殺滅曲線(kill curve)確定最佳篩選濃度,以實(shí)現(xiàn)高效篩選并最大限度降低對(duì)細(xì)胞毒性。

一些哺乳動(dòng)物細(xì)胞的建議工作濃度:

細(xì)胞系

培養(yǎng)基

Blasticidin S篩選濃度

CHO

DMEM

5-10μg/ml

HEK293

DMEM

5-15μg/ml

HeLa

DMEM

2.5-10μg/ml

Neuro2a

DMEM

30μg/ml

B16

RMPI

3-10μg/ml

PC1.0

RMPI

10-30μg/ml

THP-1

RMPI

10μg/ml

篩選步驟:

1)轉(zhuǎn)染48h后,用含適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
【注】:抗生素在細(xì)胞活躍分裂期發(fā)揮最佳效應(yīng),細(xì)胞密度過(guò)高會(huì)降低篩選效率,傳代時(shí)細(xì)胞匯合度建議控制在25%以內(nèi)。

2)隨后每3–4天棄去舊培養(yǎng)基,加入含相同濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基,持續(xù)維持選擇壓力。

37天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆形成情況。根據(jù)細(xì)胞類型及轉(zhuǎn)染/篩選效率,克隆形成時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)至14天或更久。

4)挑取5–10個(gè)抗性細(xì)胞克隆轉(zhuǎn)移至35 mm細(xì)胞培養(yǎng)皿中,繼續(xù)用選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天,隨后可進(jìn)行細(xì)胞活性或功能檢測(cè)。

  

注意事項(xiàng):

1.     Blasticidin S為有毒化合物,操作時(shí)需注意防護(hù),切勿與身體或皮膚直接接觸。

2.     為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

本產(chǎn)品僅用于生命科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷及其他用途!

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常用篩選抗生素及其使用濃度:

貨號(hào)

名稱

抗性基因

有效篩選濃度(μg/mL

NHB0003-1G

潮霉素B

Hygromycin B

大腸桿菌潮霉素抗性基因

hyghph

哺乳動(dòng)物細(xì)胞:200-500

細(xì)菌/植物細(xì)胞:100-300

真菌:300-1000

NA0531-1ML

殺稻瘟菌素S(Blasticidin S

蠟樣芽孢桿菌的bsr基因

土曲霉的BSD基因

哺乳動(dòng)物細(xì)胞:1-10

大腸桿菌:25-100

NBS2094-1ml

腐草霉素

Phleomycin

Sh ble基因(Streptoalloteichus hindustanus bleomycin gene

酵母菌:10

絲狀真菌:25-150

NBS2095-100mg

NBS2096-125mg

博萊霉素

Zeocin

Sh ble基因(Streptoalloteichus hindustanus bleomycin gene

哺乳動(dòng)物細(xì)胞:50-1000

大腸桿菌:25-50

酵母菌:50-300

NBS2099-1g

遺傳霉素

GeneticinG418

Tn601 (903)Tn5來(lái)源的新霉素抗性基因(neo

哺乳動(dòng)物細(xì)胞:200-2000

植物細(xì)胞:10-100

酵母細(xì)胞:500-1000

網(wǎng)柄菌屬:10-100

NBS8833-1ml

嘌呤霉素(Puromycin

鏈霉菌來(lái)源的嘌呤霉素N-乙酰轉(zhuǎn)移酶基因(pac

哺乳動(dòng)物細(xì)胞:1-10

大腸桿菌:100-125