BODIPY 480/508-Cholesterol 膽固醇熒光探針

產(chǎn)品簡介：

BODIPY 480/508-Cholesterol（簡稱：Bdp-Chol），CAS NO：878557-19-8，是一種具生物活性和細(xì)胞膜滲透性的膽固醇類似物，在C24位偶聯(lián)了一個BODIPY熒光基團(tuán)。HeLa細(xì)胞中，Bdp-Chol與膽固醇標(biāo)記物-脫氫麥角甾醇（Dehydroergosterol, DHE）共定位；BHK細(xì)胞中，Bdp-Chol 從質(zhì)膜運(yùn)輸進(jìn)入內(nèi)吞再循環(huán)小泡（ERC）。Bdp-Chol最大激發(fā)和發(fā)射波長分別是480nm和508nm，用于監(jiān)測細(xì)胞內(nèi)的固醇攝取和細(xì)胞器間固醇通量。

產(chǎn)品特性：

1）CAS NO.：878557-19-8

2）化學(xué)名：(T-4)-[(3β)-24-(3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-yl-κN)-24-(3,5-dimethyl-2H-pyrrol-2-ylidene-κN)chol-5-en-3-olato]difluoro-boron

3）同義名：BODIPY-Cholesterol; Bdp-Chol; BCh2; TopFluor Cholesterol; Bodipy膽固醇；TopFluor膽固醇；

4）分子式：C36H51BF2N2O

5）分子量：576.6

6）純度：≥98%

7）外觀：固體

8）Ex/Em：480/508nm

9）溶解性：溶于DMSO（1mg/ml）、DMF（1mg/ml）、乙醇（0.5mg/ml）、DMSO:PBS(pH 7.2)(1:1)（0.5mg/ml）

10）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖：

保存條件: 

-20℃避光干燥保存，至少2年有效。

產(chǎn)品使用：

以下是針對細(xì)胞樣本的染色方法，僅作參考。用戶需根據(jù)實(shí)際染色樣本和染色條件來優(yōu)化。

1、儲存液的制備

將低溫保存的固體平衡至室溫至少20min，低速離心后，于無菌工作臺內(nèi)加入適量有機(jī)溶劑（比如：無水高質(zhì)量DMSO）配置成1mM儲存液，根據(jù)單次用量分裝，充入惰性氣體后，≤-20℃避光凍存。

2、工作液的制備

于正式實(shí)驗(yàn)前，用PBS、HBSS、無血清培養(yǎng)基等稀釋儲存液，到所需的工作濃度，比如：0.1-1μM。最佳的工作濃度請參閱文獻(xiàn)或自行設(shè)置梯度濃度進(jìn)行摸索。工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。

應(yīng)用示例（來自文獻(xiàn)，僅做參考）

用BODIPY-Cholesterol進(jìn)行染色，方法如下：BODIPY-Cholesterol溶于DMSO配置1mM儲存液，分裝到玻璃瓶內(nèi)，充氮?dú)猓糜?span>-80℃凍存。精子懸液用BODIPY-Cholesterol（0.4 μM）標(biāo)記，混勻后，37℃孵育10min。通過二步法不連續(xù)梯度等密度Percoll去除多余的染料。精子調(diào)整密度到1×10⁶sperm/mL，孵育2h后進(jìn)行流式評估。

Representative images of viable (A and B) and non-viable (C) BODIPY-cholesterol labelled boar spermatozoa following 2h in non-capacitating and capacitating conditions. Note that labelling is higher in the apical sperm head than that in the post-equatorial region (indicated with arrows), which is most obvious in sperm that have not undergone capacitation (A). Upon incubation with capacitating conditions, BODIPY-cholesterol fluorescence reduces across the whole sperm head (B), which visually demonstrates the loss of this cholesterol analogue from the plasma membrane during capacitation. In non-viable spermatozoa, as assessed with propidium iodide (PI), BODIPY-cholesterol fluorescence was more intense across the entire sperm head, particularly in the equatorial region (C; indicated with an arrow), demonstrating potential intracellular labelling. Scale bar=10μm.

注意事項(xiàng)：

1.      為了讓化合物更好的溶解，可通過37℃加熱或（和）超聲波水浴中震動片刻來處理。若實(shí)驗(yàn)所需濃度過大甚至達(dá)產(chǎn)品溶解極限，請?zhí)砑又軇┲芑蜃孕姓{(diào)整濃度。

2.      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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