Dihydroethidium (DHE) 二氫乙錠 超氧化物陰離子熒光探針

產(chǎn)品簡介：

二氫乙錠（Dihydroethidium，DHE），也稱為Hydroethidine，是一種最常用的超氧化物陰離子熒光檢測探針。DHE本身是一種細胞膜滲透性的藍色探針（λ Ex/λ Em: 370/420nm），一旦進入細胞后與超氧化物陰離子反應，生成2-hydroxyethidium。2-hydroxyethidium插入核酸后產(chǎn)生紅色熒光（λ Ex/λ Em: 535/610 nm），能夠被熒光顯微鏡、流式細胞儀或其他合適儀器檢測。作為一種選擇性且靈敏的熒光探針，DHE能用來檢測吞噬細胞呼吸爆發(fā)中的活性氧（ROS）水平，也能用來檢測培養(yǎng)細胞中的超氧化物陰離子水平。DHE也能用作活體染料，流式檢測中用于完整細胞的成像和功能分析。還能用在各種凋亡模型中觀察熒光的增強。另外，DHE也能用于活細胞線粒體超氧化物生成的檢測，雖然其結(jié)構(gòu)類似物MitoSOX Red具有更加特異性的線粒體定位能力。通常情況30~40min內(nèi)能得到均勻標記的細胞。

產(chǎn)品特性：

1）CAS NO.：104821-25-2

2）化學名：5-ethyl-5,6-dihydro-6-phenyl-3,8-phenanthridinediamine，3,8-Diamino-5,6-dihydro-5-ethyl-6- phenylphenanthridine，2,7-Diamino-10-ethyl-9-phenyl-9,10-dihydrophenanthridine

3）同義名：Hydroethidine，Hydroethidium,，PD-MY 003

4）分子式：C21H21N3

5）分子量：315.41

6）純度：≥98%

7）Ex/Em：370/420nm（活細胞細胞質(zhì)內(nèi)熒光檢測）；535/610nm（活細胞染色質(zhì)熒光檢測）

8）溶解性：溶于DMSO（10mg/ml），DMF，無水乙醇和氯仿（20 mg/ml）

9）化學結(jié)構(gòu)圖：

保存條件: 

-20oC避光干燥保存，至少1年有效。

產(chǎn)品使用：

1. 工作液的配制

本品以粉末形式提供，使用前需要經(jīng)過短暫離心，用高純度的DMSO制備成5~10 mM儲液。分裝后避光凍存于-20℃。使用前用緩沖液（PBS/ HBSS/ HEPES）稀釋母液至所需工作濃度，通常5~20 μM就可以滿足實驗需求，具體的濃度要根據(jù)實驗需要進行進一步的調(diào)整。
2. 染色
  將細胞和染色液按照1:1的比例進行混合（例如，100 μL的細胞懸液加入100 μL的染色工作液），室溫或37℃孵育60 min。
3. 熒光顯微鏡觀察
  二氫乙錠本身為藍色熒光，最大激發(fā)波長為370 nm，最大發(fā)射波長為420 nm，脫氫后與RNA或DNA結(jié)合產(chǎn)生紅色熒光，最大激發(fā)波長為300 nm，最大發(fā)射波長為610 nm，實際觀察時也可以使用518 nm作為激發(fā)波長。

注意事項：

1.      本品易氧化，保存過程中盡量避免接觸空氣。需保存在氮氣或氬氣下，特別是溶液。

2.      本品對光敏感，保存和操作過程中注意避光。

3.      本品氧化后產(chǎn)生一定乙錠類化合物，毒性較大，請注意防護。

4.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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