Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM)硫化氫熒光探針

【溫馨提示】：見我司整理的硫化氫（H2S）熒光探針產品專題—WSP-1/WSP-5/AzMC。 

產品簡介：

Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM)是一種用于硫化氫（H₂S）檢測的細胞可捕獲的熒光探針。一旦進入胞內，乙酰甲酯基團被胞內酯酶水解生成一陰電荷，從而探針被捕獲停留在胞內。探針中的疊氮化物官能團與緩沖液或細胞中的H2S反應生成酰胺羅丹明110，最大激發和發射波長分別是498/526nm 。SF7-AM能用于監測人臍靜脈內皮細胞（HUVECS）中VEGF誘導產生的H₂S。 

產品特性：

1） CAS NO：1416872-50-8

2） 化學名：N-[2-[(Acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-N-[(3',6'-diazido-3

-oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'- [9H]xanthen]-5-yl)carbonyl]glycine (acetyloxy)methyl ester

3） 同義名：Sulfidefluor-7 acetoxymethyl ester; SF7 AM;

4） 分子式：C₃₁H₂₃N₇O₁₂

5） 分子量：685.6

6） 外觀：白色固體

7） 純度：≥95%

8） Ex/Em：498/526nm

9） 溶解性：溶于DMSO（5mg/ml）、DMF（10mg/ml）

保存條件: 

-20oC避光干燥保存，至少2年有效。 

產品使用：

1、 儲存液制備

將低溫保存的產品從冰箱取出，置于室溫回溫至少20min。低速離心3-5min。之后往瓶內加入適量無水DMSO充分溶解配成適宜濃度的儲存液（比如，1mg SF7-AM（Mw: 685.6）加入291μl DMSO充分溶解后即得到5mM儲存液）。按照單次用量分裝，≤-20℃避光凍存，避免反復凍融，建議1個月使用。

2、 工作濃度

正式實驗前，取上述配制的儲存液用適當緩沖液或培養基稀釋到所需工作濃度即可。具體的工作濃度請參考文獻或根據自身實驗需求來進行優化調整。參考下方一些實驗數據，來自公開文獻，僅作參考。

應用示例1：使用SF7-AM來測定VEGF刺激HUVECs產生的內源性H₂S。HUVECs加入2.5μM SF7-AM于37℃，5% CO₂孵育30min。之后更換不含探針的培養基，細胞成像。對于VEGF刺激，取2μl VEGF（10μg/ml）加入孔內使其終濃度為40ng/ml。細胞再于37℃，5% CO₂孵育30min。相同的區域再進行細胞成像。共聚焦成像用488nm氬離子激發器激發，用META檢測器收集500-650nm之間的發射熒光信號。【文獻來源：Chao, C., Zatarain, J.R., Ding, Y. et al. Cystathionine-β-Synthase Inhibition for Colon Cancer: Enhancement of the Efficacy of Aminooxyacetic Acid via the Prodrug Approach. Mol Med 22, 361–379 (2016). 】

應用示例2：使用SF7-AM來測定OA-CysTCM-1的H2S釋放能力。bEnd.3細胞鋪在多聚D-賴氨酸包被的培養板上。長滿的細胞用PBS清洗后，用SF7-AM（5 μM）孵育30min。之后用PBS清洗，孵育在含OA-CysTCM-1 (100 μM)和半胱氨酸（250 μM）或只含半胱氨酸（250 μM）的溶液30min。成像前，細胞用PBS清洗后，加入2ml PBS。用帶標準GFP濾片的熒光顯微鏡成像。【文獻來源：Zhao Y, Steiger AK, Pluth MD. Cysteine-activated hydrogen sulfide (H₂S) delivery through caged carbonyl sulfide (COS) donor motifs. Chemical Communications (Cambridge, England). 2018 May;54(39):4951-4954. DOI: 10.1039/c8cc02428f. PMID: 29701221; PMCID: PMC5965689.】

 Figure. H2S Release from OA-CysTCM-1 in bEnd.3 cells.Top: DIC (left) and GFP (right) channels with cysteine (250 μM) and SF7-AM (5 μM). Bottom: DIC (left) and GFP (right) channels with cysteine (250 μM), OA-CysTCM-1 (100 μM), and SF7-AM (5 μM). Scale bar represents 100 μM.

注意事項：

1.      整個染色過程中需注意避光。

2.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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