Invivogen ant-bl-1  Blasticidin solution（10mg/ml）

Invivogen原裝產品，現貨供應。

基本介紹：

Blasticidin S（殺稻瘟菌素），也稱為稻瘟散，滅瘟素S鹽酸鹽，從灰色鏈霉菌Streptomyces griseochromogenes分離到的一種核苷肽類抗生素。

作用機制：主要通過干擾核糖體中肽鍵的形成來特異性抑制原核和真核細胞的蛋白質合成。

Blasticidin S用于篩選攜帶bsr或BSD基因的轉染細胞。殺稻瘟菌素S具有快速而強效的作用模式，一個星期內完成陽性克隆的篩選，且很低的抗生素濃度便能導致細胞迅速死亡。

抗性基因：

三種殺稻瘟菌素抗性基因已被克隆且測序：一種是乙酰轉移酶基因，來自殺稻瘟菌素產生菌的bls基因；另外兩種是脫氨酶基因（deaminase genes），分別為來自bacillus cereus蠟樣芽孢桿菌的bsr基因，和來自Aspergillus terreus土曲霉的BSD基因。bsr和BSD基因是最主要的選擇性標記基因，用于哺乳動物和植物細胞的轉基因實驗。雖然bsr和BSD基因多用于哺乳動物細胞的篩選標記，但也可以用于E. Coli。

篩選濃度：

A、大腸桿菌（E. Coli）【常用濃度：25-100μg/ml】

E. Coli對Blasticidin敏感性很弱，但含Blasticidin抗性的轉化子可在低鹽LB固體培養基（pH 8.0），100μg/ml Blasticidin的條件下進行篩選。高pH可增強抗生素篩選活性，為了達到最佳效果，推薦使用Invivogen公司的Fast-Media?Blas培養基聯合篩選。

B、哺乳動物（Mammalian Cells）【常用濃度：1-10μg/ml】

哺乳動物細胞系Blasticidin的常用工作濃度范圍1-10μg/ml，少數情況高達30μg/ml。初次實驗建議通過滅殺曲線來確定最佳使用濃度。

某些細胞系用Blasticidin進行篩選的建議濃度：

實驗步驟：

1）Blasticidin S通常使用濃度為1-10μg/ml，初次實驗建議通過滅殺曲線來確定最佳使用濃度。

2）轉染48h后，用含適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養基將細胞傳代；（注：細胞處于活躍分裂期時抗生素工作最好。細胞密度太高，抗生素效率降低。分盤時覆蓋率最好不超過25%）

3）每3-4天去除培養基，加入含相同濃度Blasticidin的新鮮培養基；

4）7天后檢測細胞集落形成。根據宿主細胞種類和轉染/篩選效率，集落形成可能需要再增加一周或更久。

5）轉移5-10個抗性克隆到35mm細胞培養盤。加入選擇培養基維持培養7天，再進行后續實驗。

質量控制：

濃度10mg/ml，每一批次都經過嚴格檢測，確保每一批次間產品質量連續穩定。

純度：≥ 95% (HPLC)
內毒素水平：<1 EU/mg
理化特性：pH7.5, 透明
細胞培養檢測：用Blasticidin敏感和Blasticidin抗性哺乳動物細胞系檢測產品活性
無細胞毒性痕量污染物：長期培養Blasticidin抗性細胞確認無細胞毒性 

保存：

4°C短期或-20°C長期保存，避免反復凍融。