革蘭氏染色試劑盒

Gram Stain Kit for Microscopy

產(chǎn)品簡介：

革蘭氏染色法（Gram Stain）是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，于1884年由丹麥醫(yī)生Christain Gram所創(chuàng)立。由于未經(jīng)染色的細(xì)菌與周圍環(huán)境折光率差別甚小，在顯微鏡下極難觀察。而經(jīng)染色后的細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對比，能清楚觀察到細(xì)菌形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征，則可用來鑒別細(xì)菌，把眾多細(xì)菌分為兩個大類：革蘭氏陽性菌（G+）和革蘭氏陰性菌（G-）。染色原理在于：首先，細(xì)菌經(jīng)初染液（結(jié)晶紫）初染成藍(lán)紫色，再加媒染液與結(jié)晶紫結(jié)合成結(jié)晶紫-碘的復(fù)合物，增強(qiáng)了染料與細(xì)菌的結(jié)合力。革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁主要由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成，壁厚、類脂含量低，當(dāng)用脫色液脫色時細(xì)胞壁脫水、使肽聚糖層的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)孔徑縮小，透性降低，從而使結(jié)晶紫-碘的復(fù)合物不易被洗脫而保留在細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)脫色和復(fù)染液復(fù)染后仍保留初染時的藍(lán)紫色。然而，革蘭氏陰性菌（G-）的細(xì)胞壁類脂含量多，肽聚糖層較薄且肽聚糖為平面片層結(jié)構(gòu)，易被脫色液溶解，使細(xì)胞壁通透性增高，結(jié)合的結(jié)晶紫-碘染料復(fù)合物容易泄漏，細(xì)菌被脫色為無色，再被復(fù)染液復(fù)染成紅色。

本革蘭氏染色試劑盒（Gram Stain Kit for Microscopy ）在經(jīng)典的革蘭氏染色配方基礎(chǔ)上做了進(jìn)一步優(yōu)化，染色效果得以明顯增強(qiáng)，對極難染色細(xì)菌都有良好的染色表現(xiàn)。染色背景干凈，胞漿和胞質(zhì)對比強(qiáng)烈，胞內(nèi)吞噬體也可清晰辨認(rèn)，細(xì)菌染色特征典型。操作簡便，方法可靠。

保存條件: 

室溫保存，1年有效。 

產(chǎn)品組成：

產(chǎn)品使用：（適用于細(xì)菌等微生物的涂片樣本）

自備材料：

1. 接種環(huán)或挑取細(xì)菌的其他工具

2. 酒精燈

3. 載玻片

4. 光學(xué)顯微鏡

染色方法：

1. 涂片：取待檢細(xì)菌，于載玻片中央涂成一薄層，或者在載玻片上滴加少許無菌水，取菌與水混合均勻，涂成一薄層。

【注意】：涂片之前，請事先在背面做好圓圈標(biāo)記，以便于判斷后續(xù)試驗的位置。

2. 干燥：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫，使其迅速干燥。

3. 固定：手持載玻片一端，標(biāo)本面朝上，在酒精燈的火焰外側(cè)快速來回移動3~5次，每次1s，溫度不宜過高，防止菌體蛋白變性，放置待涼后染色。也可用甲醇或乙醇固定。

【注意】：加熱固定涂片時，請注意玻片不要太靠近火焰。一般要求玻片溫度不超過60℃，以玻片背面觸及手背皮膚不覺過燙為宜。

4. 初染：滴加初染液染色1~2min，之后清水沖洗掉染色液。

5. 媒染：滴加媒染液，并覆蓋載玻片，室溫放置1~2min，之后水洗。

6. 脫色：滴加脫色液，搖動10~30s，直至流下的脫色液不出現(xiàn)紫色時為止，立即用水沖洗掉脫色液來終止反應(yīng)。

7. 復(fù)染：滴加復(fù)染液染色30~60s，之后水洗、待干。

8. 鏡檢：置油鏡觀察。

染色結(jié)果：

注意事項：

1.      取細(xì)菌時應(yīng)要注意自我防護(hù)，拔出和塞進(jìn)試管塞的時候，應(yīng)將試管口通過火焰略微燒灼，最后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。

2.      革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握脫色程度，脫色時間應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗判斷。脫色過度，陽性菌可被誤染為陰性菌；脫色不夠，陰性菌可被誤染為陽性菌。

3.      待檢細(xì)菌培養(yǎng)時間會影響染色，陽性菌培養(yǎng)時間過長或已死亡或細(xì)菌溶解，常呈陰性。

4.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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