Nile Red 尼羅紅

產品簡介：

尼羅紅（Nile Red），是一種脂質探針（lipophilic probe），能用于定位和定量細胞內的脂質，特別是中性脂滴。作為一種環境敏感型熒光探針，尼羅紅在水和其他極性溶劑中基本無熒光，但在非極性環境中發生顯著的熒光增強和吸光/發射光譜藍移（Ex/Em ~552/636 nm，甲醇溶液），可用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。流式細胞術對尼羅紅（單一染色）和尼羅紅/抗CD3單克隆抗體（雙標染色）的檢測方法可用來監測外周血白細胞和淋巴細胞磷脂沉積（PLD）。

產品特性：

1）CAS NO：7385-67-3

2）化學名：9-(Diethylamino)-5H-benzo[a]phenoxazin-5-one 9-(二乙胺基)-5H-苯并[a]吩惡嗪-5-酮

3）同義名：Nile blue A oxazone尼羅絲

4）分子式：C20H18N2O2

5）分子量：318.37g/mol

6）外觀：淺綠色至棕色粉末

7）純度：>95%（HPLC）

8）溶解性：溶于甲醇、乙醇、DMSO

9） Ex/Em：552/636 nm（in metahnol）

10）化學結構圖：

保存條件: 

室溫避光保存，可置于2-8 oC長期保存，至少1年有效。

產品使用：

一、 工作液制備

1）母液準備：取適量的尼羅紅（MW：318.37g/mol）用無水DMSO充分溶解制備1mM儲存液，按照單次用量分裝凍存，避免反復凍融，避光保存。

2）工作液準備：用HHBS或生理緩沖液，pH 7將母液按1:1000稀釋為1×尼羅紅工作液，漩渦混勻。

【注1】：尼羅紅的實際染色濃度請參考文獻或實驗室體系來調整。以上只做參考。

二、 染色步驟

1）用檢測化合物處理細胞一段時間。

2）離心并調整細胞濃度為1-5×10⁵cell/管。

3）用500μl尼羅紅工作液重懸細胞。

4）室溫或37oC避光孵育5-10min。

5）吸掉染色工作液，用HHBS或適當緩沖液清洗細胞。

6）用500μl預熱的HHBS或培養基重懸細胞，使細胞密度為1-5×10⁵cell/管。

7）熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測熒光信號，Ex/Em = 552/636 nm。

【注1】：對于貼壁細胞，可用HHBS或適當緩沖液清洗細胞，然后直接加入尼羅紅工作液孵育。

【注2】：細胞也可預固定，然后用尼羅紅工作液染色。

注意事項：

1.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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