FM 4-64 (N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(Diethylamino) Phenyl) Hexatrienyl) Pyridinium Dibromide) 

神經末梢熒光探針

產品簡介：

FM 4-64，英文全名：N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(Diethylamino) Phenyl) Hexatrienyl) Pyridinium Dibromide，是一種親脂的苯乙烯染料，用作一種活細胞探針示蹤酵母整體膜內在化和運輸到液泡。FM 4-64是一種靈敏的液泡動力學分析探針，檢測一系列相關事件，包括有絲分裂中的分離結構形成、液泡分裂和融合事件，以及液泡蛋白質分揀蛋白突變體在不同階段的液泡形態。

FM 4-64具水溶性、對細胞無毒性，在水溶液中基本無熒光，一旦插入脂膜表面發出強的紅色熒光。FM 4-64與呈綠色熒光的FM1-43（貨號：NBS3210）在合適的濾片能夠區分開，允許雙色實時觀察膜的再循環。

產品特性：

1） 同義名：N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(diethylamino)phenyl)hexatrienyl)pyridinium dibromide

2） 分子式：C30H45Br2N3

3） 分子量：607.51

4） 純度：≥90%（HPLC）

5） 外觀：紫色固體 

6） 溶解性：溶于水、DMSO

7） Ex/Em：558/734nm

8） 溶解性：溶于水

9）化學結構圖：

保存條件: 

-20°C避光干燥保存，至少1年有效。

產品使用：

1. 儲存液配制

于實驗前，將凍干粉置于室溫回溫至少20min，加入無菌水或DMSO配制成10mM或其他濃度儲存液，比如，對于1mg FM 4-64（MW: 607.51）加入164μl DMSO,充分溶解后即得到10mM儲存液，根據單次用量分裝，≤-20℃凍存，避免反復凍融。

2. 染色方法（僅作參考）

【注意】：a）以下以爬片生長的貼壁活細胞的質膜染色為例，僅作參考。最佳的染色條件根據使用細胞特征進行調整。

b）由于FM 4-64快速被內吞，很有必要參考下方的溫度和時間指導來減慢內吞，提高質膜的選擇性標記和成像。內吞很可能在染色的10min內發生。

c）以下步驟推薦使用不含鈣鎂的HBSS。鈣鎂的存在明顯會加速染料內吞，導致質膜選擇性染色很弱。

2.1用提前冰浴的HBSS緩沖液來稀釋儲存液到所需的工作濃度比如8μM。

2.2將蓋玻片從培養基內取出，快速的浸入含足量FM 4-64的染色工作液，冰上孵育1min。質膜能被快速染色。

2.3將蓋玻片從染色工作液中取出，置于載玻片上封片，周圍用石蠟密封，置于冰上，立即成像。

注意事項：

1.      熒光染料都存在淬滅的問題，保存和操作過程中注意避光。

2.      FM^?是Molecular Probe公司的注冊商標。

3.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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