FM 2-10 (N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(4-(diethylamino)styryl) pyridinium dibromide)

神經末梢熒光探針

產品簡介：

FM 2-10，英文全名：N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(4-(diethylamino)styryl)pyridinium dibromide，是一種親脂的苯乙烯染料，是一種優秀的膜探針用來鑒定活躍的放電神經元和用于調研活動依賴性的囊泡循環。這一水溶性的染料對細胞無毒，且在水溶液中基本無熒光，一旦插入細胞膜外層后發射強熒光。在活躍釋放神經遞質的神經元中，FM 2-10染料內在化進入循環的突出囊泡，神經末梢被明亮染色。

FM 2-10是FM 1-43（貨號：NBS3210）的結構類似物，具更高的親水性，因此，能夠在某些定量應用中表現出更快的脫色速率。

產品特性：

1） 同義名：N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(4-(diethylamino)styryl)pyridinium dibromide

2） 分子式：C26H41Br2N3

3）分子量：555.43

4） 純度：≥95%（HPLC）

5） 溶解性：溶于水

6） Ex/Em：506/620nm (MeOH); 480/598 (membrane-bound);

7）化學結構圖：

保存條件: 

-20°C避光干燥保存，至少1年有效。

產品使用：

1. 儲存液配制

于實驗前，將凍干粉置于室溫回溫至少20min，加入無菌水配制成10mM或其他濃度儲存液，比如，對于1mgFM 2-10（MW:555.43）加入180μl DMSO,充分溶解后即得到10mM儲存液，根據單次用量分裝，≤-20℃凍存，避免反復凍融。

2. 染色方法（僅作參考）

【注意】：a）以下以爬片生長的貼壁活細胞的質膜染色為例，僅作參考。最佳的染色條件根據使用細胞特征進行調整。

b）由于FM 2-10快速被內吞，很有必要參考下方的溫度和時間指導來減慢內吞，提高質膜的選擇性標記和成像。內吞很可能在染色的10min內發生。

c）以下步驟推薦使用不含鈣鎂的HBSS。鈣鎂的存在明顯會加速染料內吞，導致質膜選擇性染色很弱。

2.1用提前冰浴的HBSS緩沖液來稀釋儲存液到所需的工作濃度比如8μM。

2.2將蓋玻片從培養基內取出，快速的浸入含足量FM 2-10的染色工作液，冰上孵育1min。質膜能被快速染色。

2.3將蓋玻片從染色工作液中取出，置于載玻片上封片，周圍用石蠟密封，置于冰上，立即成像。

注意事項：

1.      熒光染料都存在淬滅的問題，保存和操作過程中注意避光。

2.      苯乙烯染料在水溶液中基本無熒光，最大發射波長具pH依賴性。苯乙烯染料的光譜特征在甲醇或氯仿中測定。其在膜環境中的最大激發和最大發射波長都會變短。最大激發波長的差異通常在20nm，發射波長的差異通常是80nm，但依具體的探針有所差異。

3.      FM^?是Molecular Probe公司的注冊商標。

4.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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