EZ poly?S轉染試劑
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 |
NBS0213-0.5ml | EZ poly?S轉染試劑 | 0.5ml |
NBS0213-1ml | EZ poly?S轉染試劑 | 1ml |
NoninBio轉 染 試 劑 對標產品列表
品牌 | NoninBio | Invitrogen | polyplus |
DNA專用 | Lipofectamine 2000 /1.5mL | jetOPTIMUS?/1.5mL | |
DNA和RNA通用 | Lipofectamine 3000 /1.5mL | jetPRIME?/1.5mL | |
RNA 專用 | Lipofectamine RNAiMAX /1.5mL | INTERFERin?/1mL | |
懸浮細胞專用 | PEIpro?/1.5mL | ||
mRNA 專用 | Lipofectamine RNAiMAX /1.5mL | jetMESSENGER? /0.75mL | |
體內專用 | Invivofectamine 3.0 /10 次 | in vivo -jetRNA? /1mL |
產品簡介:
EZ poly?S轉染試劑是一款專用于懸浮細胞轉染的DNA轉染試劑,可用于質粒DNA在懸浮生長細胞中的傳送。它適用于大規模蛋白生產,及工業化生產中的真核細胞轉染。具有不受血清影響、毒性低、穩定性好、轉染簡單易行、重復性好等優點。
應用范圍:
EZ poly?S轉染試劑特別適用于293F和CHO-S等懸浮細胞的轉染。在有血清和無血清的條件下,均可得到較高的轉染效率,且重復性好。在大規模蛋白生產中,操作簡單、蛋白表達量高、細胞毒性低、細胞通用性好。
保存條件:
2-8℃保存一年
運輸:
常溫運輸
質粒DNA的轉染:
以100mL培養瓶為例,請參考表1的轉染規模調整,步驟如下:
1 | 細胞接種: 0.2~0.5×106/mL個細胞,接種于20mL培養基中。在37℃,120rpm,5%CO2的條件下培養。 |
2 | 質粒稀釋: 將10 μg質粒稀釋于Opti-MEM培養基中,終體積50 μL。 |
3 | 轉染試劑稀釋: 取20μL的EZ poly?S轉染試劑加入到30μL的 Opti-MEM培養基中,稀釋后的終體積為50μL |
4 | 復合物制備:將上述質粒DNA稀釋液和轉染試劑稀釋液混合,輕輕吹打均勻后,室溫靜置10分鐘 |
5 | 將上述100μL復合物加入到細胞培養瓶中,繼續搖動培養培養18~48小時后檢測轉染效率,無需更換培養基 |
質粒DNA的轉染優化:
可通過改變細胞密度、 DNA濃度以及EZ poly?S轉染試劑濃度對轉染進行優化。EZ poly?S 轉染試劑(μL): DNA (μg)可以在1:1和5:1之間調整。轉染大于48h后,可通過適量添加培養基的方式延長轉染時間。
表1. 不同培養瓶所需轉染試劑和DNA的用量
培養瓶 | 細胞數量 | 接種 培養基 | Opti-MEM 稀釋后終體積 | DNA轉染 | |
試劑用量 | DNA | ||||
50mL | 0.5×106/mL | 10mL | 50μL | 10μL | 5μg |
100mL | 0.5×106/mL | 20mL | 100μL | 20μL | 10μg |
250mL | 0.5×106/mL | 50mL | 200μL | 50μL | 25μg |
500mL | 0.5×106/mL | 100mL | 400μL | 100μL | 50μg |
1L | 0.5×106/mL | 200mL | 2mL | 200μL | 100μg |
5L | 0.5×106/mL | 1L | 4mL | 1mL | 500μg |