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<NBS0201> 單組份TMB顯色液(Elisa HRP 顯色用)

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<NBS0201> 單組份TMB顯色液(Elisa HRP 顯色用)

單組份TMB顯色液(Elisa HRP 顯色用)
貨號:NBS0201-100ml
品牌:NoninBio
促銷: 200.00
價格: 250.00
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NBS0201 -100ml

產品簡介:

酶聯免疫分析技術(ELISA)廣泛用于抗原、半抗原或抗體的定量或定性分析,辣根過氧化物酶(HRP)及其偶聯物是ELISA技術常用的一種酶,能催化底物如3,3'5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)發生顯色反應,從而進行定量或定性分析。由于TMB比其他顯色底物具更高的靈敏度且無致癌性被廣泛使用,TMB主要用于ELISA,免疫斑點雜交或免疫組化等實驗,也有報道將其用于氯的檢測分析。

通常TMB顯色試劑由多個組分構成,必須在使用前進行配制,并且容易產生沉淀,使用相對不便且容易導致檢測結果不穩定。本品采用全新的TMB顯色技術,將所有相關試劑全部配在一個溶液,即僅由單一溶液組成,不僅簡化了操作步驟,而且使檢測結果更加穩定可靠。

本品專門為ELISA實驗而設計。檢測原理在于HRP或其他適當過氧化物酶能催化生成可溶的藍色產物,此時通常可在370nm測定吸光度。當顯色反應被酸性溶液(如0.5-2M H2SO40.5M HCL1M H3PO4)終止后,產物由藍色轉為黃色,此時可在450nm測定吸光度。由于本品顯色敏感度高,線性濃度范圍較寬,極其適合用于定量ELISA分析。

本品用于ELISA檢測,每個樣品通常使用0.1ml顯色液,即100ml本品約檢測1000個樣品。

 

保存條件:

4℃避光保存,兩年有效。


注意事項:

1.      本品含TMBH2O2,對人體有刺激性,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2.      如發現本品出現渾濁或顏色變為藍色,請停止使用。


產品使用:

1.      使用之前,取出適量單組份TMB顯色液,使其回到室溫再開始使用。

2.      參考ELISA檢測試劑盒的實驗步驟,當與HRP標記抗體孵育一段時間后,用適當洗滌液洗滌3-5次,每次3-5min

3.      洗滌完畢后,去除洗滌液,加入100μl單組份TMB顯色液。

4.      室溫避光孵育5-30min或更長時間(可長達24h),直至顯色到預期深淺。建議根據實驗需求選擇最佳試劑用量、顯色時間和反應溫度。

5.      直接在370nm測定吸光度。或者加入100μl 0.5-2M H2SO4終止反應,隨后在450nm測定吸光度。


常見問題:

1.      背景顯色太深

1)      如果背景(沒有樣品的對照)顯色太深,一方面需考慮使用適當的封閉液進行封閉,如商品化封閉液或者和一抗相同來源的血清(10%)進行封閉。另一方面,使用經過適當吸附的二抗,以減小二抗的非特異性吸附。

2)      可以考慮縮短顯色時間,或降低二抗濃度。另外,選擇適當強度的洗滌液,或延長洗滌時間也會有所幫助。

2.      沒有顯色或顯色太弱

1)      適當提高一抗或二抗的濃度。檢測二抗效果,滴一滴稀釋二抗在離心管內,檢測二抗是否被正常顯色。

2)      可以考慮使用更加靈敏的放大檢測體系,例如生物素檢測體系。

3)      可以適當延長顯色時間。

4)      如果上述改進不能獲得預期效果,可以考慮更換效果更好的一抗或ELISA試劑盒。


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