Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas

核糖核酸酶A，來源于牛胰腺

Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas  核糖核酸酶A，來源于牛胰腺

NBS0302-100mg

NBS0302-500mg

NBS0302-1g

品牌：NoninBio

關鍵詞

Ribonuclease 3’-pyrimidinooligonucleotidohydrolase 核糖核酸3′-嘧啶寡核苷酸水解酶；Ribonuclease I 核糖核酸酶I；Pancreatic ribonuclease 胰核糖核酸酶；Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas；EC No: 3.1.27.5；CAS NO：9001-99-4；

產品描述

核糖核酸酶A，英文名Ribonuclease A，縮寫RNase A，CAS NO：9001-99-4，一種核糖核酸內切酶（endoribonuclease），特異性識別嘧啶類核苷酸3’-核糖磷酸基團，如序列pG-pG-pC-pA-pG經切割產生pG-pG-pCp和A-PG，當切割單鏈RNA時活性最高，推薦工作濃度為1-100μg/ml，兼容于各種反應體系。低鹽濃度（0-100mM NaCl），可切割單鏈RNA，雙鏈RNA，以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈。高鹽濃度（≥0.3M），RNase A僅特異性切割單鏈RNA。RNase A不會水解DNA，因DNA缺少形成環形中間體必需的2’-OH。

核糖核酸酶A，英文名Ribonuclease A，縮寫RNase A，常常用在質粒DNA或基因組DNA制備過程中去除RNA，此制備過程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一，可采用水浴煮沸這種傳統方法來滅活DNase活性。也可以用來去除蛋白樣品中的RNA污染。另外，RNase A還可用于RNA序列分析，RNA酶保護分析等實驗。

產品特性

1）CAS NO：9001-99-4

2）來源：牛胰腺

3）比活力：≥50 Kunitz units/mg

4）最佳工作pH：7.6（pH 6.0-10.0有活性）

5）最佳工作溫度：60℃（15-70℃有活性）

6）激活劑：鈉鹽、鉀鹽等

7）抑制劑：核酸酶抑制劑（RNase inhibitor）

8）穩定性：RNase在加熱和去污劑條件下都很穩定。RNase A溶液可耐受溫度高達100℃。于此高溫下，pH 2.0-4.5范圍內溶液穩定性最高。

9）溶解性：溶于水（10mg/ml）

保存與運輸方法

保存：-20℃干燥凍存，3年穩定。

運輸：冰袋運輸。

使用方法

1.  儲存液制備

【注意】：此為RNase A儲存液配制的常用方法之一，也可以根據實驗室傳統的方法，或者參考文獻資料使用其他方法制備儲存液（如直接溶于10mM Tris-HCl, pH 7.4）。

a）取適量RNase A溶解于10mM醋酸鈉（pH 5.2），配制成10mg/ml RNase A儲存液；

b）100℃加熱15min，之后冷卻到室溫，然后加入1/10體積的1M Tris-HCl（pH 7.4），調其pH至7.4（例如，5ml 10mg/ml的RNase儲存液加入500μl 1M Tris-HCl, pH7.4）；

c）分裝成單次用量于-20℃凍存，可穩定保存1年。

【注意】：在中性條件下煮沸RNase A溶液，會有RNase沉淀形成；在更低的pH下將其煮沸，如有沉淀可以觀察到，可能由于蛋白雜質存在造成。煮沸之后若發現沉淀，可通過高速離心（13,000 rpm）去除雜質，然后分裝凍存。

2. 使用濃度

【注意】：本品應用非常廣泛，具體的使用方法和工作濃度請根據實驗經驗或參考文獻來調整。

RNase A常用在質粒DNA制備中去除RNA污染，在此應用中，可直接加入DNase-free RNase A儲存液，使其終濃度為10μg/ml。