<101000028> Polyplus siRNA/miRNA轉染試劑INTERFERin?

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Polyplus siRNA/miRNA轉染試劑INTERFERin?
貨號：101000036， INTERFERin? 0.1 mL；
101000028， INTERFERin? 1 mL；
101000016， INTERFERin? 5 x 1 mL
品牌：Polyplus

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Polyplus siRNA/miRNA轉染試劑INTERFERin?(101000028)

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101000036	INTERFERin? 0.1 mL
101000028	INTERFERin? 1 mL
101000016	INTERFERin? 5 x 1 mL

產品簡介：

INTERFERin?已經在1nM siRNA下提供了非常高的沉默效率，并且可以用于多種粘附細胞和懸浮細胞。使用低濃度的siRNA可以避免脫靶效應，其溫和的作用模式確保了更可靠的數據和優異的細胞活力。由于其與血清和抗生素的兼容性，INTERFERin?易于使用，也非常適合轉染miRNA和其他寡核苷酸，如pre-miRNA, mimic miRNA, antimiR….

一、更少的siRNA，更少的脫靶效應

一些出版物表明，轉染低濃度的siRNA可以避免脫靶效應。事實上，當以高濃度轉染siRNA時，可以觀察到這些不想要的非特異性副作用（1，2）。因此，可以通過使用盡可能少的siRNA來提高實驗數據的可靠性。這就是為什么INTERFERin?被專門設計為使用低siRNA濃度提供高沉默效率的原因。

INTERFERin?介導的1nM特異性siRNA的遞送顯示出對基因表達的選擇性和高效敲低，而競爭對手（L2K）需要至少10nM的siRNA才能達到50%的沉默效率（圖1）。

圖1:INTERFERin?只需要1 nM的siRNA即可實現有效的基因沉默。根據制造商的建議，使用INTERFERin?或競爭對手L2K用抗-Luc siRNA轉染穩定表達螢火蟲螢光素酶的3LL細胞。48小時后使用常規測定法測量螢光素酶的表達。對照siRNA未觀察到抑制作用。

令人驚訝的是，在10pM的siRNA下仍然實現了50%的沉默（圖2）。

圖2:INTERFERin?即使在極低的siRNA濃度下也是高效的。A549-GL3Luc細胞在血清存在下使用INTERFERin?轉染，并降低抗-Luc siRNA的濃度。48小時后使用常規測定法測量螢光素酶的表達。對照siRNA未觀察到抑制作用。

用INTERFERin?轉染靶向內源性層粘連蛋白A/C的1nM siRNA可將層粘連蛋白基因表達顯著降低至幾乎無法檢測的水平（圖3）。

圖3：用INTERFERin?轉染1nM siRNA導致有效和特異的基因沉默。使用INTERFERin?用1nM層粘連蛋白A/C siRNA轉染CaSki細胞。48小時后，通過免疫熒光顯微鏡測定層粘連蛋白A/C沉默效率。

二、適用于miRNA轉染

microRNA（miRNA）寡核苷酸的轉染正越來越多地用于分析特定miRNA對細胞功能的生物學影響。INTERFERin?是遞送miRNA、miRNA模擬物或前miRNA的首選試劑。

INTERFERin?是最新一代siRNA和miRNA轉染試劑，專為在多種細胞中實現高轉染效率而設計，可實現高基因沉默或刺激基因表達。事實上，一些miRNA也已知通過與感興趣基因的啟動子結合來誘導基因表達。例如，INTERFERin?介導的miR-373遞送導致E-鈣粘蛋白表達增加3倍（圖4）。

圖4：用INTERFERin?轉染miR-373可增強E-鈣粘蛋白的表達。將PC-3細胞接種在6孔板中，并用miR-373（25 nM）轉染，每孔使用8μl的INTERFERin?。轉染后72小時，通過RT-qPCR測定E-鈣粘蛋白mRNA的表達水平。

INTERFERin?的陽離子組分只需要很少的寡核苷酸量，從而實現溫和的轉染過程。此外，簡單而穩健的協議確保了可重復的結果。像miRNA這樣的寡核苷酸可以用少量的INTERFERin?轉染，從而導致強烈的基因沉默或刺激基因表達。無論使用何種濃度的INTERFERin?，效果都大致相同，使INTERFERin成為一種經濟的試劑。例如，使用不同體積的INTERFERin?的折疊變化總是在1.5和1.8之間（圖5）。