Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas

核糖核酸酶A，來源于牛胰腺

Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas  核糖核酸酶A，來源于牛胰腺

NBS0302-100mg

NBS0302-500mg

NBS0302-1g

品牌：NoninBio

關(guān)鍵詞

Ribonuclease 3’-pyrimidinooligonucleotidohydrolase 核糖核酸3′-嘧啶寡核苷酸水解酶；Ribonuclease I 核糖核酸酶I；Pancreatic ribonuclease 胰核糖核酸酶；Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas；EC No: 3.1.27.5；CAS NO：9001-99-4；

產(chǎn)品描述

核糖核酸酶A，英文名Ribonuclease A，縮寫RNase A，CAS NO：9001-99-4，一種核糖核酸內(nèi)切酶（endoribonuclease），特異性識(shí)別嘧啶類核苷酸3’-核糖磷酸基團(tuán)，如序列pG-pG-pC-pA-pG經(jīng)切割產(chǎn)生pG-pG-pCp和A-PG，當(dāng)切割單鏈RNA時(shí)活性最高，推薦工作濃度為1-100μg/ml，兼容于各種反應(yīng)體系。低鹽濃度（0-100mM NaCl），可切割單鏈RNA，雙鏈RNA，以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈。高鹽濃度（≥0.3M），RNase A僅特異性切割單鏈RNA。RNase A不會(huì)水解DNA，因DNA缺少形成環(huán)形中間體必需的2’-OH。

核糖核酸酶A，英文名Ribonuclease A，縮寫RNase A，常常用在質(zhì)粒DNA或基因組DNA制備過程中去除RNA，此制備過程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一，可采用水浴煮沸這種傳統(tǒng)方法來滅活DNase活性。也可以用來去除蛋白樣品中的RNA污染。另外，RNase A還可用于RNA序列分析，RNA酶保護(hù)分析等實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特性

1）CAS NO：9001-99-4

2）來源：牛胰腺

3）比活力：≥50 Kunitz units/mg

4）最佳工作pH：7.6（pH 6.0-10.0有活性）

5）最佳工作溫度：60℃（15-70℃有活性）

6）激活劑：鈉鹽、鉀鹽等

7）抑制劑：核酸酶抑制劑（RNase inhibitor）

8）穩(wěn)定性：RNase在加熱和去污劑條件下都很穩(wěn)定。RNase A溶液可耐受溫度高達(dá)100℃。于此高溫下，pH 2.0-4.5范圍內(nèi)溶液穩(wěn)定性最高。

9）溶解性：溶于水（10mg/ml）

保存與運(yùn)輸方法

保存：-20℃干燥凍存，3年穩(wěn)定。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

使用方法

1.  儲(chǔ)存液制備

【注意】：此為RNase A儲(chǔ)存液配制的常用方法之一，也可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室傳統(tǒng)的方法，或者參考文獻(xiàn)資料使用其他方法制備儲(chǔ)存液（如直接溶于10mM Tris-HCl, pH 7.4）。

a）取適量RNase A溶解于10mM醋酸鈉（pH 5.2），配制成10mg/ml RNase A儲(chǔ)存液；

b）100℃加熱15min，之后冷卻到室溫，然后加入1/10體積的1M Tris-HCl（pH 7.4），調(diào)其pH至7.4（例如，5ml 10mg/ml的RNase儲(chǔ)存液加入500μl 1M Tris-HCl, pH7.4）；

c）分裝成單次用量于-20℃凍存，可穩(wěn)定保存1年。

【注意】：在中性條件下煮沸RNase A溶液，會(huì)有RNase沉淀形成；在更低的pH下將其煮沸，如有沉淀可以觀察到，可能由于蛋白雜質(zhì)存在造成。煮沸之后若發(fā)現(xiàn)沉淀，可通過高速離心（13,000 rpm）去除雜質(zhì)，然后分裝凍存。

2. 使用濃度

【注意】：本品應(yīng)用非常廣泛，具體的使用方法和工作濃度請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)或參考文獻(xiàn)來調(diào)整。

RNase A常用在質(zhì)粒DNA制備中去除RNA污染，在此應(yīng)用中，可直接加入DNase-free RNase A儲(chǔ)存液，使其終濃度為10μg/ml。