Golgi-Tracker Green (BODIPY? FL C5-Ceramide)

高爾基體綠色熒光探針（活細胞成像用）

我司提供多款高爾基體（Golgi apparatus）熒光探針:

【1】NBD C6-Ceramide【綠色熒光，適用于活細胞和固定細胞】

【2】BODIPY?TR Ceramide【紅色熒光，適用于活細胞】

【3】BODIPY?FL Ceramide【綠色熒光，適用于活細胞，可能某些情況下也呈現紅色熒光，取決于在細胞內的定位】

產品簡介：

Golgi-Tracker Green是神經酰胺的熒光偶聯物，即BODIPY? FL標記的C5-ceramide（BODIPY? FL C5- Ceramide），選擇性結合高爾基體（Golgi apparatus），Ex/Em=505/511nm（光譜特征見Fig 1），用熒光素光學濾片設置來觀察。Golgi-Tracker Green與同類型的NBD C6-ceramide相比較，表現出更好的抗光衰減性和更明亮的熒光，在很多應用上都能替代NBD C6-ceramide。Golgi-Tracker Green也能用于鞘脂運輸和代謝研究，測定Schwann細胞合成脂類的速率，以及標記細胞輪廓以便在共聚焦顯微鏡下觀察形態運動。

本產品Golgi-Tracker Green是與BSA結合后的復合物，不僅避免有機溶劑的引入，而且對活細胞呈現出更高效的高爾基體標記率。本品另提供稀釋液B（Diluent B），使用更便捷。本品適用于活細胞的高爾基體熒光標記，不適用于固定細胞。若需要做固定細胞的高爾基體染色，可選擇NBD C6- ceramide（貨號：NBS7694-1mg）。

Fig . Golgi-Tracker Green的激發和發射光譜圖。

保存條件: 

-20oC避光干燥保存，至少6個月有效。 

產品組成：

產品使用：

1. Golgi-Tracker Green工作液的配制

① 第一次使用本品，可將Golgi-Tracker Green (0.5mM)根據單次用量分裝，比如10μl/管。本品一管含30μl（總量：1mg），由于本身量微少，務必低速離心后再開蓋，然后用低吸附槍頭吸取母液，并分裝-20℃凍存，避免反復凍融。

② 吸取少量Golgi-Tracker Green (0.5mM)按照1：100的比例用Golgi-Tracker稀釋液來稀釋，比如：取10μl Golgi-Tracker Green (0.5mM)加入到1ml Golgi-Tracker稀釋液中，混勻后即為Golgi-Tracker Green工作液，工作液請現配現用。

【注意】：Golgi-Tracker Green的工作濃度可以根據實際情況進行適當調整，推薦的稀釋比例調整范圍為1:50~1:200。

2. 活細胞高爾基體的熒光標記

① 去除細胞培養液，用適量的溶液如Hanks平衡鹽溶液（含鈣鎂）或其他緩沖液來洗滌生長在蓋玻片上的細胞。

② 去除洗滌液，加入新鮮配制的Golgi-Tracker Green染色工作液，4℃孵育30min。

③ 吸走染色液，用冰浴預冷的細胞培養液洗滌細胞3次左右，換新鮮培養液37℃再孵育30min。

④ 用新鮮培養液再洗滌一次，隨后用熒光顯微鏡進行觀察。此時可觀察到高爾基體呈明亮的強熒光染色，而細胞內的其他膜系統呈比較微弱的熒光染色。

染色示例：

Fig . Selective staining of the Golgi apparatus using the green-fluorescent BODIPY FL C5-ceramide (NBS7696) (top panel). At high concentrations, the BODIPY FL fluorophore forms excimers that can be visualized using a red longpass optical filter (bottom panel). 

注意事項：

1.      整個染色過程中需注意避光。

2.      Golgi-Tracker Green在4℃，冰浴等較低溫度下會凝固而粘附在離心管官底、管壁或管蓋內，可將置于25℃水浴溫育片刻直至全部融解后使用。對于微量液體，每次使用前低速離心使得液體全部沉降至管底，再開蓋使用。

3.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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