Magneti-G Control IgG Beads

產品介紹 

Magneti-G Control IgG Beads含有和Magneti-G標簽抗體磁珠相同的IgG亞型，由高質量的IgG和納米級磁珠偶聯而成，可用作免疫沉淀(IP)、免疫 共沉淀(Co-IP)等抗體相關實驗時Magneti-G標簽抗體磁珠的對照磁珠（陰性對照）。

磁珠性質 

高聚物磁珠采用高分子聚合技術將超順磁性材料和高分子材料完美地結合在一起，具有更快的磁響應性同時保持微球良好的分散性、極低的非特異性 吸附和更豐富的結合位點。磁珠具體性能見表1。 

表1：Magneti-G Control IgGBeads產品性能

使用方法 

本操作流程和Magneti-G標簽抗體磁珠操作流程完全一樣，每次反應使用20μl Magneti-G Control IgG Beads。

1 推薦緩沖液（自備）

表2：緩沖液配置

2 磁珠漂洗 

1）將磁珠充分混勻后取20ul磁珠置于離心管中，向管中加入500ul洗雜緩沖液，上下顛倒混勻5-10次。 

2）將離心管置于磁力架上，待磁珠全部吸附后，吸棄上清。 

3）向管中加入500ul洗雜緩沖液，上下顛倒混勻5-10次，將離心管置于磁力架上，待磁珠全部吸附后，吸棄上清。 

4）重復操作3次。

3 樣品孵育

1）向上述漂洗好的磁珠中加入500-1000ul的細胞裂解樣品，常溫或4℃下孵育60min（建議在旋轉混勻儀上孵育，使樣品和磁珠充分接觸）。 

2）孵育結束后，將離心管置于磁力架上，待磁珠全部吸附后，將上清轉移至新的離心管中，留樣備檢。 

3）向離心管中加入500ul 洗雜緩沖液，輕輕顛倒混勻5-10次后將離心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附后棄去上清。 

4）重復操作5次。 

注：孵育溫度和時間范圍推薦為：室溫0.5h-2h或者4℃、1h-4h，根據實際的結合效果適當調整孵育時間，一般情況下不建議過夜孵育，過夜孵育 可能會引起過多的非特異性吸附。磁珠每次洗滌，加入洗雜緩沖液后可以冰上靜置3-5分鐘。

4 蛋白洗脫 

1) 洗脫液洗脫 

每20ul原始磁珠體積加入40ul洗脫液，常溫或4℃洗脫5-10min，期間輕輕混勻3-5次。孵育結束后將離心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附后， 吸取上清至新的離心管中，加入少量的中和緩沖液將pH調至中性，最后進行Western檢測。 

2) SDS-PAGE上樣緩沖液洗脫 

每20ul原始磁珠體積加入60ul的1×SDS Loading Buffer，輕搖搖晃混勻后95-100℃高溫處理5-10min。將離心管置于磁力架上分離10s，取上清 進行SDS-PAGE電泳或進行Western檢測。

注意事項 

1) 本產品保存在2-8℃，不可凍結保存； 

2) 本產品出現輕微團聚屬正常現象，可正常使用； 

3) 本產品不要使用含有DTT等還原劑的細胞裂解液樣品，DTT可能會導致抗體配體的脫落； 

4) 本產品能耐受≤2M尿素，高濃度的尿素會導致抗體配體脫落； 

5) 在清洗和洗脫時避免吸取到磁珠，清洗時吸取到磁珠會影響最終的載量，洗脫時吸取到磁珠會影響目的蛋白的質量和電泳效果，第一次洗脫后可 以將洗脫液置于新的離心管中，再次置于磁力架上進行吸附。