HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus
產品線 | 產品目錄名稱 | 規格 | 貨號 | 目錄價 |
分子生物學 | HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus | 5*1 mL | BR0015-01 | 350 |
產品介紹
本產品是一款使用SYBR GreenⅠ嵌合熒光法進行qPCR反應的專用預混液。核心組分Hot-start Taq是基于抗體法修飾,搭配針對qPCR 系統優化的最適Buffer,顯著提高了擴增特異性和低拷貝基因的檢測靈敏度,能夠在寬廣的定量范圍內得到優異的擴增線型,對靶基因進行 準確定量、檢測,重復性好,可信度高。本產品中含有ROX Reference Dye,適用于大部分qPCR儀器。本產品是一款2 × 預混液,只需額外加 入引物、模板即可,使用方便。
注意事項
1 使用前,請上下顛倒輕輕均勻混合,避免起泡,并經輕微離心后使用。試劑沒有混勻,其反應性能會有所下降,不能用振蕩器混勻。
2 融解后的試劑請于冰上放置。
3 反應液的配制、分裝請一定使用新的 (無污染的) 槍頭、Microtube等,盡量避免污染。
運輸與保存方法
冰袋( wet ice)運輸。收到產品后放到-20℃避光保存。
實驗流程
配置如下PCR反應體系
成分 | 體積 |
2 × HS Universal qPCR Master Mix, ROX plus | 10 μL |
Primer F (10 μM) | 0.4 μL |
Primer R (10 μM) | 0.4 μL |
Template DNA | X μL |
ddH?O | Up to 20 μL |
表1. HS Universal qPCR Master Mix,ROX plus 反應體系
建議PCR程序
步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 95°C | 30 sec–3 min | 1 Cycle |
循環反應 | 95°C | 10 sec | 40 Cycles |
55–60°C | 10–30 sec | ||
融解曲線 | 95°C | 15 sec | 1 Cycle |
60°C | 60 sec | ||
95°C | 15 sec |
表2. HS Universal qPCR Master Mix,ROX plus 反應程序
95℃ 30 sec 該預變性條件適合大多數擴增反應,如模板結構復雜,GC含量高,可將預變性時間延長至3min,以提高預變性效果,同時酶活可以更高程度釋放,得到更好的實驗結果。