Hoechst 33258染色液(即用型)，10μg/ml

溫馨提示：見我司整理的細胞核（Cell Nuclear）熒光探針產品專題。

產品描述：

Hoechst染料是一類在顯微觀察中標記DNA的熒光染料。因為這類熒光染料能標記DNA，所以它們也經常用于細胞核和線粒體的顯像觀察。這類染料中有兩個相關的染料Hoechst 33258和Hoechst 33342經常使用。這兩種染料都在紫外光下350nm處被激發，都在461nm處最大發射光附近發射藍/青色熒光。Hoechst染料可以用于活細胞或者固定化細胞，并且經常用來代替其它核酸染料如DAPI。這兩種染料關鍵的不同點在于，Hoechst 33342加有乙基，這使它具有更強的親脂性，因此能更好的透過完整的細胞膜。而且有些種類的細胞由于可以更有效地將進入細胞的Hoechst染料主動轉運到細胞外，因此在一些實驗中，Hoechst 33258的滲透性明顯比Hoechst 33342要弱些。這些染料也可以用來檢測樣品中的DNA含量，通過繪制發射光強度與DNA含量的標準曲線。Hoechst 33258是一種可透過細胞膜并對DNA染色的細胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光。
    Hoechst 33258常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258-DNA的激發和發射波長分別為350nm和460nm。

產品特性

1）CAS NO：23491-45-4

2）英文同義名：4-[5-(4-Methyl-1-piperazinyl)[2,5'-bi-1H-benzimidazol]-2'-yl]-phenol.trihydrochloride;bisBenzimide H 33258trihydrochloride; HOE 33258; BBIH; BXI-72;NSC33407;

3）中文同義名：雙苯酰亞胺H 33258三鹽酸鹽；赫斯特熒光染料33258；煙酸己可堿三鹽酸鹽；甲嗪雙苯咪酚三鹽酸鹽；

4）分子式：C25H24N6O · 3HCl

5）分子量：533.88

6）外觀：黃色至深黃色粉末

7）溶解性：溶于水（10 mg/ml）

8）Ex/Em：346/460 nm；352/461 nm（Hoechst 33258-DNA）；

保存與運輸方法

保存：-20°C避光保存，2年有效。

運輸：冰袋運輸。

使用方法（適用于大多數細胞）：

一．對于固定的細胞或組織：

1．對于細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst 33258染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續的Hoechst 33258染色。

2．對于貼壁細胞或組織切片，可以在蓋玻片上或細胞培養板中原位染色，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，并混勻。室溫放置3-5分鐘。

3．吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。

4．直接在熒光顯微鏡下或封片后熒光顯微鏡下觀察。觀察細胞凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。

二．對于活細胞或組織：

1．加入適當量Hoechst 33258染色液，必須充分覆蓋待染色的樣品，通常對于6孔板，一個孔需加入1ml染色液，對于96孔板每一個孔需加入100ul染色液。

2．在適宜于細胞培養的溫度培養20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。

注意事項：

1）Hoechst 33258對人體有一定刺激性，請注意適當防護。

2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。

3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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