D型多聚賴氨酸 Poly-D-lysine(PDL) 5 mg/ml

貨號(hào)：NBS6014-400ul

規(guī)格：400ul

品牌：NoninBio

產(chǎn)品描述

多聚賴氨酸（poly-lysine）是一種帶正電荷的氨基酸聚合物，能夠結(jié)合于DNA，紅細(xì)胞膜或任何帶負(fù)電荷蛋白，是一種非特異性的細(xì)胞粘附因子，促進(jìn)細(xì)胞吸附到固相基質(zhì)上。作用機(jī)理在于其可增強(qiáng)細(xì)胞膜表面的負(fù)電荷離子和固相基質(zhì)表面（如細(xì)胞培養(yǎng)皿，載玻片等）的靜電相互作用。當(dāng)吸附到培養(yǎng)表面后，多聚賴氨酸提高用于細(xì)胞結(jié)合的陽離子結(jié)合位點(diǎn)數(shù)。多聚賴氨酸分子量的大小與粘度相關(guān)，即分子量較低，粘度較低，使用越容易；分子量較高，粘度較高，提供的粘附位點(diǎn)也較多。分子量＞30,000的聚賴氨酸適用于促進(jìn)細(xì)胞粘附到固體基質(zhì)。 

多聚賴氨酸（poly-lysine）有兩種常見亞型，D-和L-型。由于多聚賴氨酸是細(xì)胞結(jié)合的非特異性粘附因子，兩種亞型都可用作包被固體基質(zhì)，在細(xì)胞培養(yǎng)中都可促進(jìn)細(xì)胞的貼壁生長。據(jù)報(bào)道多聚L-賴氨酸能夠改善蛋白在ELISA培養(yǎng)板上的粘附性。然而細(xì)胞應(yīng)用中，某些細(xì)胞能夠水解多聚L-賴氨酸。此種情況必須使用多聚D-賴氨酸作為粘附因子，從而保護(hù)細(xì)胞不會(huì)因攝取過量L-賴氨酸而被破壞。 

本品為無菌的D型多聚賴氨酸（Poly-D-lysine）溶液，濃度為5mg/ml，分子量為150,000-300,000，可直接稀釋后用于細(xì)胞或組織培養(yǎng)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)。

保存與運(yùn)輸方法

保存：?20°C避光保存，1年穩(wěn)定。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)

1）   在某些細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中，一些細(xì)胞會(huì)消化多聚 L-賴氨酸并吸收，攝入過多的多聚 L-賴氨酸會(huì)產(chǎn)生一定的細(xì)胞毒性。因此，遇到這種情況建議選用D型多聚賴氨酸（Poly-D-lysine）。

2）   本品以氫溴酸（HBr）的形式提供，每個(gè)賴氨酸殘基約含一個(gè)HBr。HBr的存在使得多聚賴氨酸能溶于中性緩沖液，通過透析除去鹽離子。

3）   為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.      細(xì)胞培養(yǎng)用包被基質(zhì)

使用D型多聚賴氨酸進(jìn)行細(xì)胞相關(guān)包被實(shí)驗(yàn)，需根據(jù)不同的細(xì)胞系和應(yīng)用進(jìn)行包被條件的優(yōu)化。一般步驟如下：
1）使用無菌組織培養(yǎng)級(jí)水或者PBS將5mg/ml poly-D-lysine儲(chǔ)存液稀釋到最適合自身實(shí)驗(yàn)體系的包被濃度。通常情況下，常用的培養(yǎng)皿/板包被濃度為0.1mg/ml，即將儲(chǔ)存液稀釋50倍后使用。

2）無菌條件下包被細(xì)胞培養(yǎng)板，使用量0.5ml-1.0ml/25cm2。輕輕搖動(dòng)板底以使其覆蓋整個(gè)板面

3）5min后，用槍移除培養(yǎng)板表面溶液，并用無菌組織培養(yǎng)級(jí)水或者PBS清洗板面；【注意】：有的情況需要1~2h來完成鋪板，有的時(shí)候需要過夜鋪板。依情況而定。

4）至少干燥2h后，方可進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

【注意】：如果多聚賴氨酸包被后的玻璃器皿或玻片必須除菌，可用γ-射線照射（而非高壓滅菌）對(duì)其進(jìn)行除菌。

【注意】：如果包被表面不平整，可用1mM醋酸鎂預(yù)處理玻璃載玻片2-3h，徹底清洗干凈后再開始包被。或者，玻璃載玻片用酸清洗（鹽酸或硫酸），經(jīng)此處理能讓多聚賴氨酸溶液包被很平整。

2.      組織學(xué)研究（玻片的包被）

使用無菌組織培養(yǎng)級(jí)水或者PBS將5mg/ml poly-D-lysine儲(chǔ)存液稀釋到最適合自身實(shí)驗(yàn)體系的包被濃度，一般推薦0.1%（w/v）的poly-D-lysine溶液用于組織學(xué)玻片的制備。

將玻片用相應(yīng)濃度的多聚賴氨酸溶液處理5min后，清洗玻片并將其室溫過夜干燥或者在約60℃的烤箱內(nèi)烘干~1h。【注意】：此工作溶液裝在塑料瓶中于4℃保存，并限制使用次數(shù)在4次以內(nèi)。