D型多聚賴氨酸 Poly-D-lysine(PDL) 5 mg/ml

貨號：NBS6014-400ul

規格：400ul

品牌：NoninBio

產品描述

多聚賴氨酸（poly-lysine）是一種帶正電荷的氨基酸聚合物，能夠結合于DNA，紅細胞膜或任何帶負電荷蛋白，是一種非特異性的細胞粘附因子，促進細胞吸附到固相基質上。作用機理在于其可增強細胞膜表面的負電荷離子和固相基質表面（如細胞培養皿，載玻片等）的靜電相互作用。當吸附到培養表面后，多聚賴氨酸提高用于細胞結合的陽離子結合位點數。多聚賴氨酸分子量的大小與粘度相關，即分子量較低，粘度較低，使用越容易；分子量較高，粘度較高，提供的粘附位點也較多。分子量＞30,000的聚賴氨酸適用于促進細胞粘附到固體基質。 

多聚賴氨酸（poly-lysine）有兩種常見亞型，D-和L-型。由于多聚賴氨酸是細胞結合的非特異性粘附因子，兩種亞型都可用作包被固體基質，在細胞培養中都可促進細胞的貼壁生長。據報道多聚L-賴氨酸能夠改善蛋白在ELISA培養板上的粘附性。然而細胞應用中，某些細胞能夠水解多聚L-賴氨酸。此種情況必須使用多聚D-賴氨酸作為粘附因子，從而保護細胞不會因攝取過量L-賴氨酸而被破壞。 

本品為無菌的D型多聚賴氨酸（Poly-D-lysine）溶液，濃度為5mg/ml，分子量為150,000-300,000，可直接稀釋后用于細胞或組織培養相關的實驗。

保存與運輸方法

保存：?20°C避光保存，1年穩定。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1）   在某些細胞培養應用中，一些細胞會消化多聚 L-賴氨酸并吸收，攝入過多的多聚 L-賴氨酸會產生一定的細胞毒性。因此，遇到這種情況建議選用D型多聚賴氨酸（Poly-D-lysine）。

2）   本品以氫溴酸（HBr）的形式提供，每個賴氨酸殘基約含一個HBr。HBr的存在使得多聚賴氨酸能溶于中性緩沖液，通過透析除去鹽離子。

3）   為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.      細胞培養用包被基質

使用D型多聚賴氨酸進行細胞相關包被實驗，需根據不同的細胞系和應用進行包被條件的優化。一般步驟如下：
1）使用無菌組織培養級水或者PBS將5mg/ml poly-D-lysine儲存液稀釋到最適合自身實驗體系的包被濃度。通常情況下，常用的培養皿/板包被濃度為0.1mg/ml，即將儲存液稀釋50倍后使用。

2）無菌條件下包被細胞培養板，使用量0.5ml-1.0ml/25cm2。輕輕搖動板底以使其覆蓋整個板面

3）5min后，用槍移除培養板表面溶液，并用無菌組織培養級水或者PBS清洗板面；【注意】：有的情況需要1~2h來完成鋪板，有的時候需要過夜鋪板。依情況而定。

4）至少干燥2h后，方可進行細胞培養。

【注意】：如果多聚賴氨酸包被后的玻璃器皿或玻片必須除菌，可用γ-射線照射（而非高壓滅菌）對其進行除菌。

【注意】：如果包被表面不平整，可用1mM醋酸鎂預處理玻璃載玻片2-3h，徹底清洗干凈后再開始包被。或者，玻璃載玻片用酸清洗（鹽酸或硫酸），經此處理能讓多聚賴氨酸溶液包被很平整。

2.      組織學研究（玻片的包被）

使用無菌組織培養級水或者PBS將5mg/ml poly-D-lysine儲存液稀釋到最適合自身實驗體系的包被濃度，一般推薦0.1%（w/v）的poly-D-lysine溶液用于組織學玻片的制備。

將玻片用相應濃度的多聚賴氨酸溶液處理5min后，清洗玻片并將其室溫過夜干燥或者在約60℃的烤箱內烘干~1h。【注意】：此工作溶液裝在塑料瓶中于4℃保存，并限制使用次數在4次以內。