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<NBS0401> DNase l 脫氧核糖核酸酶 I

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<NBS0401> DNase l 脫氧核糖核酸酶 I

DNase l 脫氧核糖核酸酶 I
貨號:NBS0401-15ku,NBS0401-50ku
品牌:NoninBio
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Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas

脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺

DNase l 脫氧核糖核酸酶 I 

貨號:NBS0401-15ku,NBS0401-50ku

品牌:NoninBio


產品描述

脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,在大多數細胞和組織中都能發現的一種核酸內切酶,偏好切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,產生5’端為磷酸基團、3’端為羥基的多聚核苷酸,平均消化產物最小為多聚四核苷酸。Mg2+存在條件下,DNase I可隨機識別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點;而在Mn2+存在條件下,DNase I識別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點進行切割。DNase I可水解多種形式DNA,如單鏈DNA、雙鏈DNA,甚至染色質(其切割速率受組蛋白影響)。

脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,最早從胰腺中分離而來,至今哺乳動物胰腺也是最主要的來源之一。DNase I以兩對二硫鍵結合的多種糖蛋白混合形式存在。最佳的工作范圍是pH 7-8,DNase的活性依賴于Ca2+,并可被二價金屬離子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原來的1/2。

本品來自牛胰腺,色譜純化制備,常用于去除蛋白或RNA樣品中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使標記堿基插入DNA。本品以含氯化鈣的凍干粉形式供應,比活≥2000Kunit Units/mg蛋白。

 

產品特性

1.CAS NO:9003-98-9

2.蛋白純度:≥80%(biuret),色譜純化

3.比活力:≥2000Kunit Units/mg protein

4.活力定義:25℃,pH5.0條件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分鐘ΔA260增加0.001的變化定義為一個酶活力單位(Kunitz unit)。

5.激活劑:多種二價金屬離子如Mg2+、Mn2+、Ca2+、Co2+、and Zn2+

6.抑制劑:β-巰基乙醇;螯合劑;SDS;肌動蛋白;并沒有特異性抑制DNase I酶活的通用抑制劑,比如檸檬酸鹽抑制Mg2+活化的DNase I,但不能影響Mn2+激活的DNase I。

7.溶解性:溶于0.15M NaCl(5mg/ml),無色透明溶液

 

保存與運輸方法

保存:凍干粉-20℃干燥凍存,至少3年穩定。

運輸:冰袋運輸。

 

常見問題

1. 如何溶解DNase I粉末?

將本品溶解于0.15 M NaCl溶液,可配置成5-10 mg/ml的儲存液,-20℃分裝凍存。需要注意:本品儲存液即使-20℃分裝凍存,一周可能會有<10%活力損失;置于2-8℃,約會有20%活力損失。

2.如何將本品活力換算成質量?

根據本品各批次的比活力和蛋白含量,比如當酶比活力為2000 Kunits/mg,蛋白含量為100%(biuret)也,那么15KU=15000Kunits/2000Kunits/mg/100%=7.5mg本品。

3.使用多大濃度DNase I用來去除溶液內的DNA?

在含50mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2的溶液體系內,加入20-50μg DNase I,并于37℃孵育60min以去除DNA污染。本用量僅作參考,具體實驗請做適當調整。


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