5-FAM SE (5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester)

5-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯

產品簡介：

5-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester,5-FAM SE）是5/6-FAM SE（FITC-NHS）的單一純化異構體，是5-FAM的胺反應性琥珀酰亞胺酯。是最受歡迎的綠色熒光染料之一，用于多肽、蛋白和核苷酸的標記，也能用于制備各種小熒光分子。

產品特性：

1） CAS NO.：92557-80-7

2） 同義名：5-FAM, SE;5-FAM,NHS ester;5-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester;5-Carboxyfluorescein NHS ester;5-Carboxyfluorescein, succinimidyl ester; 5-羧基熒光素N -羥基琥珀酰亞胺酯；5-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯；

3） 分子式：C₂₅H₁₅NO₉

4） 分子量：473.39

5） 熒光：λex 492 nm; λem 517 nm in DMF

6） 外觀：粉末

7） 溶解性：溶于DMSO、DMF

8） 純度：≥95%

保存條件: 

-20℃避光干燥保存，2年有效。 

注意事項：

1.       5-FAM SE對濕度敏感。為了避免產品受潮，務必在開蓋前將低溫保存的產品從冰箱取出，平衡至室溫至少30min再使用。

2.      熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

3.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

SE化合物生物標記的幾個考慮因素：

1） 溶劑

大多數情況下，SE化合物（反應性染料）都是疏水性分子，需用無水DMF或DMSO作為溶劑。比如：5-FAM SE（Mw：473.39）需先溶于高質量無水DMSO配制成≥1mg/ml的母液，之后加入反應緩沖液中進行標記實驗。強烈推薦新鮮配制母液和工作液，如果非要保存母液的話，請務必根據單次用量分裝，≤-20℃避光密封干燥保存，盡量在1個月內用完。

2） 反應pH

SE與胺的標記反應具非常強的pH依賴性。胺反應化合物與非質子化的脂肪胺反應，包括：蛋白的末端胺，賴氨酸的ε-氨基。氨酰化通常在pH 7.5以上進行。通過SE基團的蛋白修飾通常在pH 7.5-8.5之間進行，而異硫氰酸基團需在pH 9.0-10.0之間才能獲得最佳的標記效果。

3） 反應緩沖液

緩沖液含游離胺（比如：Tris、甘氨酸和巰基化合物）必須避免，因為這些也是胺反應試劑。銨鹽（硫酸銨或醋酸銨）普遍用于蛋白沉淀中，必須在進行染料標記之前去除。

比如：5-FAM SE進行蛋白標記，可選擇50mM硼酸鈉緩沖液（pH 8.5）作為反應緩沖液。

4） 反應溫度

大部分標記反應在室溫進行，然而，對于某些特殊的標記反應可能需提高或降低溫度。